文献综述

1 alpha;-L-鼠李糖苷酶

alpha;-L-鼠李糖苷酶是一种水解酶，可以作用于糖苷键,是一种能够催化水解多种天然产物末端鼠李糖的糖苷水解酶。该酶在自然中广泛存在，不同来源的的结构不同，其催化特性也不尽相同^[1]。

alpha;-L-鼠李糖苷酶可以作用于alpha;-1，alpha;-1，alpha;-1，alpha;-1，以及alpha;1连接的糖苷键，可以水解多种天然化合物，其中包括橙皮苷、芦丁、槲皮苷、柚皮苷及一些萜烯类糖苷等天然化合物。由于鼠李糖苷酶能广泛地催化多种底物，使得其在食品、药品等众多领域有广泛的应用^[2]。

1.1 来源

鼠李糖苷酶的来源比较广，广泛分布于自然界的细菌和真菌中。国内关于鼠李糖苷酶研究，主要集中在犁头霉代谢产生的alpha;-L-鼠李糖苷酶，国外研究相对较多，主要有黑曲霉、白曲霉、棘孢曲霉、青霉菌、拟杆菌属和热微菌门等。

真菌中的alpha;-L-鼠李糖苷酶一开始来源于青霉菌和曲霉菌代谢生产的酶制剂。近年来，可以用土曲霉和构巢曲霉生产alpha;-L-鼠李糖苷酶。最新研究表明，在哺乳动物组织^[3-4]、植物^[5]、细菌^[6-7]、真菌^[8]中都已经发现了alpha;-L-鼠李糖苷酶；但真菌和细菌仍然是alpha;-L-鼠李糖苷酶最主要的来源，当然也是目前被广泛研究的。曲霉菌和青霉菌都可以产生很高酶活力的alpha;-L-鼠李糖苷酶；然而霉菌通常同时分泌表达alpha;-L-鼠李糖苷酶和beta;-D-葡萄糖苷酶。

1.2分类

鼠李糖苷酶主要有两大类，即alpha;-L-鼠李糖苷酶(EC 3.2.1.40)和beta;-L-鼠李糖苷酶鼠李糖苷酶(EC 3.2.1.43)^[9]，分别对应催化水解alpha;-L-鼠李糖中位于非还原性末端的鼠李糖残基和beta;-L-鼠李糖中位于非还原性末端的鼠李糖残基。也就是说，鼠李糖苷酶主要还是以L-鼠李糖苷酶为主。alpha;-L-鼠李糖苷酶主要存在于动物的肝脏、细菌以及真菌中^[10]，主要有真菌类如犁头霉、曲霉属、青霉属、裂殖菌属。西菌类如芽孢杆菌属、拟杆菌属、乳杆菌属、单胞菌属。该酶也存在于鼠李糖脂、微生物的杂多糖以及外膜脂多糖抗原表面结构的重复单元中。此外，植物细胞壁果糖蛋白胶、多糖以及次级代谢物如花青甙、类黄酮和三萜烯类等化合物中也含有alpha;-L-鼠李糖苷酶。

1.3.1重组酶Tprha的酶学性质

目前，在90℃时，重组alpha;-鼠李糖苷酶Tprha有最高酶活力。在95℃时相对酶活力约达到80%。然而在75℃到90℃的范围内，该重组酶Tprha相对酶活在50%左右，说明该重组具有相对广泛地催化温度区间。在90℃条件下，分别测定重组酶Tprha在pH 3.5-7.0条件下的酶活力。重组酶Tprha的最适pH为4.5，且在pH4.5保持较高的酶活力，其适宜的反应pH范围较为狭窄。

alpha;-L-鼠李糖苷酶可以催化水解alpha;连接的糖苷键，如alpha;-1，2;alpha;-1，3;alpha;-1，4;alpha;-1，6以及alpha;1连接的不同糖苷键。不同来源的alpha;-L-鼠李糖苷酶水解不同的糖苷键，例如Absidia sp.39中的alpha;-L-鼠李糖苷酶可以水解alpha;-1，2糖苷键，Absidia sp.90中的水解alpha;-1，6糖苷键，而S.avenae中的水解alpha;-1，4糖苷键等^[1]。

1.4应用

由于鼠李糖苷酶广泛的催化多种底物德性质，因而在医药食品等众多领域中得到广泛的应用。alpha;-L-鼠李糖苷酶可以水解多种天然化合物糖基末端并释放出鼠李糖，如橙皮苷、芦丁、槲皮苷、柚皮苷以及一些萜烯类糖苷等天然化合物。基于alpha;-L-鼠李糖苷酶的这些重要潜在价值， 该酶的研究和开发是海内外学者的焦点。