生防菌株JK-XZ8对樱花根癌病菌的拮抗作用及其种类鉴定

立项依据：

【研究背景】樱花根癌病的病原为根癌土壤杆菌（Agrobacterium tumefaciens）, 为一种细菌性肿瘤土传病害^[1]。根癌土壤杆菌因寄主范围高达几百余种植物而十分普遍，其中包括蔷薇科植物、银杏、杨树等^[2]。植物根癌病的病原早在1907年就被科学家Smith以及Townsend证明为细菌，然而研究进展却不是十分顺利，没有获得十分有效的防治方法。直到1972年，澳大利亚教授Kerr等人成功运用放射土壤杆菌Agrobacterium radiobacter K84^[3]对根癌菌进行处理，为根癌病防治提供了重大贡献和思路^[4]。【研究目的】由于根癌土壤杆菌是一种普遍性病害，它的分布范围也是在世界各地，我国也有根癌病的普遍发生，但在上世纪八十年代前并没有得到足够重视和及时处理，也缺乏针对性的研究^[5]。而近些年，林木根癌病的发生速度和危害程度越来越高，我国也开始了相关的研究。然而相比较于根癌土壤杆菌，葡萄土壤杆菌（Agrobacterium vitis）的研究更为透彻并取得了显著成果，所以需要对根癌土壤杆菌进行更深入的调查^[6]。本课题组前期在徐州沛县樱花根际土壤筛选到一株细菌菌株JK-XZ8，并且在实验室内测定和野外都已初步证明其对樱花根癌病的拮抗作用。该菌株经初步鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis），但研究发现其与枯草芽孢杆菌有一定差异。为此，本研究拟就该菌株对樱花根癌病菌的拮抗作用进行分析，通过进一步采用生理生化特性测定和特异性基因检测的手段对该菌株进行鉴定。以期通过筛选、鉴定、拮抗作用测定选出最合适的菌株再进行今后的定殖试验和野外应用，为利用生防菌株控制樱花根癌病的发生奠定基础。

文献综述：

1樱花根癌病的发生情况

樱花（Cerasus sp.），原产日本，在我国主要分布在南京、北京、武汉等城市及华东地区，主要特点是花先叶开放，花白或者粉红，是一种深受人们喜爱的木本花卉观赏树种。由于日本樱花属于引进物种，所以会携带一些病虫害，其中就包括樱花根癌病^[7]。据不完全调查，樱花根癌病在引种地区均有不同程度的发病率，其中江苏一带比较严重，最高可达70%以上，这样严重威胁樱花的生存和发展，为此，我国各地区开始采取各种措施进行防治处理^[4]。

2樱花根癌病的病原及症状

2.1 病原

樱花根癌病属于由根癌土壤杆菌（A. tumefaciens）作为病原而引起的细菌性病害。根癌土壤杆菌属于土壤杆菌属，菌体短杆状，具l～3根极生鞭毛,其革兰氏染色反应为阴性，有较薄的细胞壁，属于薄壁菌门^[8]。