毕业论文课题相关文献综述

1.1肿瘤靶向研究

手术、放化疗等临床治疗是清除肿瘤瘤体的有效手段，但手术仅能切除肉眼可见的瘤体，不能切除不可见的亚临床病灶和已通过血路、淋巴路转移或直接浸润到周围正常组织的肿瘤细胞。放疗是局部照射，不能杀灭非照射部位的肿瘤，对一些不敏感的肿瘤细胞也无能为力。化疗虽是全身治疗的方法，但对肿瘤细胞的选择性抑制不强，对休眠期的肿瘤细胞更无效果[1]。鉴于此，近年来开发了不少治疗肿瘤的新方法、新技术。其中分子靶向治疗已成为现阶段研究的热点和趋势。分子靶向治疗是指在肿瘤分子生物学的基础上，将与肿瘤相关的特异分子作为靶点，利用靶分子特异制剂或药物进行治疗的手段。这种以病变细胞为靶点的治疗，相对于手术、放化疗三大传统治疗手段具有最彻底的治本功效[2][3]。生物可降解材料作为基因和药物载体，是肿瘤靶向治疗研究的热点。通过物理或者化学的方法将药物吸附、分散或溶解在高分子材料载体中形成的微小球状实体称为药物微球。不同类型的药物微球具有药物释放的缓释特性，可以通过改变微球的性质使其具有特定组织及器官靶向性，是一种新型的给药系统[4]。许多材料均可用于制备微球，其中生物可降解的合成高分子材料受到普遍的重视并得到广泛应用[5]。

1.2靶向材料

纳米递送靶向癌细胞的研究是当今的一个热点，各种靶向材料也是层出不穷，其中研究较多的有壳聚糖、脂质体、阳离子聚合物。

1.2.1阳离子脂质体

阳离子脂质体(cationicliposomes,CL)是发展最为成熟的非病毒类基因载体，具有较好的安全性和较高的基因传递效率。阳离子脂质体首先由Felgner等应用于核酸类药物的传递。他们将阳离子脂质N-[1-(2,3-二油酰氧基)丙基]-N,N,N-三甲基氯化铵(DOTMA)和中性磷脂二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)以等摩尔比制备得阳离子脂质体，用作基因药物载体。阳离子脂质体通常由一种阳离子双亲性分子和一种中性脂质组成。作为一种基因载体，CL携带DNA并与细胞发生作用的过程可简单表述为：带正电的阳离子脂质体与带负电的核酸药物通过电荷相互吸引作用,形成复合物，并可通过细胞内吞作用或膜溶合作用进入胞内，核酸药物进入核内表达，或调控基因表达。迄今，共有85项基于阳离子脂质体的基因治疗已被批准进入临床试验，占基因治疗临床试验数的8.6%。临床上初步的积极成果，对阳离子脂质体的更深入研究具有极大的促进作用。新型阳离子脂质体的寻找、合成及开发，是基因载体研究的热点[6]。

1.2.2阳离子多聚物

相对于阳离子脂质体，阳离子聚合物具有更高的包载率，应用前景更佳。阳离子聚合物纳米粒能够通过静电作用与阴离子药物形成复合物，把其包裹起来或吸附到表面，再通过胞吞作用进入细胞并形成内涵体，随后内涵体破裂释放药物，从而发挥干扰效应。

合成的或天然的阳离子聚合物结构上的一个共同特点是分子内含有许多氨基，在生理pH下会发生质子化，这些质子化的氨基可以与负电荷之间的静电吸附作用而发生电性中和，而自组装成稳定的多聚复合物(polyplexes)，减少抗癌药毒副作用，避免癌细胞多药耐药。多聚复合物大小约50～500nm，带正电荷，可与细胞表面带负电荷的受体结合，因此能有效被细胞内吞摄入。对于合成的聚合物，很容易改变其分子质量，对其进行结构修饰以及连接靶向基团。但目前使用阳离子聚合物的临床试验很少，需要对其内吞机制、毒性等进行更详尽的研究[7]。

1.2PLGA纳米微球在基因递送中的应用研究

聚乳酸--羟基乙酸共聚物(poly(1acticCOglycolicacid)，PLGA)是由两种单体一乳酸(LA)和羟基乙酸(GA)随机聚合而成的，是一种可降解的功能高分子有机化合物。美国食品药品监督管理局(FDA)已经认定PLGA具有良好的生物相容性和安全性，被广泛应用于人类的临床医学研究。PLGA水解以后的产物是乳酸和羟基乙酸，这两种物质同时也是人体代谢途径的副产物，因此PLGA无毒，反复给药以后不会在体内蓄积，是一种良好的载体。

PLGA微球中包载药物的释放同PLGA的生物可降解特性是密切相关的。PLGA微球进入人体后，随着自身的缓慢降解，可以逐渐释放出其中包载的药物。微球中药物的释放特性在很大程度上影响药物微球的治疗效果。PLGA微球的分子量不同、制备工艺不同、乳酸与羟基乙酸的比例、链末端结构不同，都会影响PLGA的释放特性，进一步影响其中包载药物的释放[8]，从而影响体内血药浓度。

除了小分子药物以外，PLGA微球还可以用于包载基因药物，包括DNA、RNA和siRNA。用生物可降解的PLGA制备微球作为基因药物递送载体具有许多优势[9]，例如溶酶体逃逸功能，保护其中包载的基因药物免遭核酸酶的降解，有助于体内基因的高效持续性表达，靶向性修饰等，有望成为一种安全有效的新型基因传递系统。物质从溶酶体内腔(Endo-lysosomalcompartment)向细胞质的快速释放[10]以及其在细胞内的滞留也表明包载DNA的PLGA可以作为一个有效的基因药物递送载体[11]。

为了改进PLGA药物载体的性能，研究人员对微球结构进行多方面的改进，如偶联具有肿瘤分子靶向性的RGD分子、转铁蛋白分子及单克隆抗体等，赋予载体肿瘤靶向性，与脂质体[12]或其它阳离子聚合物制备复合纳米微球。Danhier等人[13]将PLGA微球表面偶联具有肿瘤靶向性的RGD分子，以该微球做为紫杉醇药物递送载体，与未偶联RGD的PLGA微球进行比较研究。体外实验结果表明RGD/PLGA微球进入人脐静脉内皮细胞((HUVEC)中的量高于未偶联RGD的PLGA微球，说明在PLGA上偶联RGD分子能够使微球具有靶向性。OjuJeon的一项研究指出，在PLGA纳米微球表面共价连接一段核定位信号序列(Nuclearlocalizationsigna,NLS)可以使基因转染效率提高1.23.2倍，同时使基因至少在13d内持续表达[14]。