一株高产海藻糖酵母的筛选鉴定文献综述
2021-09-30 22:54:34
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文献综述
海藻糖作为一种应激代谢物,能赋予低等动物、植物和微生物等抵抗营养缺乏、高温、低温、干燥、高渗透压、有毒物质等恶劣环境的能力,它具有在严酷环境下保护生物体的生物膜、脂质体、蛋白质、核酸等结构和功能的特殊功效,它使细胞内保持湿润,防止细胞内各种养分的损失,从而让这些生物处于无水生活状态,如在生产具有较高耐贮性的活性干酵母时,海藻糖含量在11%以下的干酵母,其活性保存期短,不易贮存;海藻糖含量在12%至14%左右时,其保存期间可延长4-6个月;而当海藻糖含量超过16%时,其保存期可达12个月以上。由此可见,海藻糖在保护生物体结构和功能上所起的决定性作用。
海藻糖保护的酶体系的高温稳定性在生物传感器的应用上也具有良好的前景。在国外目前已经作为甜味剂、质构改良剂、稳定剂、保湿剂和辅助用剂等,广泛应用于焙烤食品、饮料、硬质或软质糖果、果酱、速食食品中。海藻糖已广泛地应用于酶制剂、农业、高抗性菌种选育和医学领域。海藻糖还可在外科领域用来保护皮肤、血液和器官等,为器官移植和生殖工程等提供有力的保障。
1832年初Wiggers从黑麦的麦角菌中首次分离出海藻糖结晶化合物。1858年,Berthelot从一种海藻中分离到这种物质,于是定名为海藻糖。海藻糖广泛存在于自然界中,如动植物及微生物中,尤其是在酵母、霉菌以及蘑菇等真菌中其含量可达15%以上。天然海藻糖在常温下是白色结晶,易溶于水、热乙醇,不溶于乙醚、丙酮,无毒无害,无过敏性,具有甜味,在体内可被降解成葡萄糖而被利用。海藻糖是无毒产热的双糖,且它对热、酸非常稳定,是天然双糖中最稳定的糖,不为一般的酶所分解,只为具有特异性的海藻糖酶水解,不能使斐林试剂还原。
通过高温高渗透压从极端环境中筛选出产海藻糖合酶较高的一株原始菌株NO.62,以此为出发菌株,采用紫外线、亚硝基胍为诱变剂依次单独处理,最终获得一支高产海藻糖合酶突变株P-23-37,该菌株生长良好,传代稳定,每克干菌体可转化麦芽糖生成海藻糖由出发菌株的1031.55mg提高到2311.3mg,是一株目前理想的海藻糖合酶菌株,具有工业化开发前景。
获得P-23-37最适培养条件:培养温度为41℃,pH为5.5,发酵液中NaCl浓度5.97%,培养时间62.4h,装液量为l00mL发酵液/500mL三角瓶,接种量为10%。其最适培养基为:为麦芽糖2%、蛋白陈0.5%、牛肉膏0.2%、K2HP040.1%、
MgS047H200.05%。
1950年Laura首次从各种酵母中制备出海藻糖,并证明了活性干酵母中海藻糖含量较高。
Yoshikawa采用73℃、45%-50%的乙醇从面包酵母中获得了较高的提取率。
BlehaM.用面包酵母乙醇提取,先使海藻糖浓缩到20%-30%,再用超滤等方法提纯,浓缩到40%-85%再结晶,收获较高产量。
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