毕业论文课题相关文献综述

青霉素酰化酶(penicillin acylase，EC3.5.1.11)又称为青霉素酰胺酶或青霉素氨基水解酶，是β-内酰胺抗生素酰基转移酶家族的一个亚类。

该酶为可逆酶，一般在酸性或中性条件下可以催化6-氨基青酶烷酸(6-APA)[1]、7-氨基脱乙酰头孢烷酸(7-ADCA)母核和酰基侧链发生酰基化反应制备半合成抗生素[2]；而在偏碱性条件下可以催化青霉素和头孢菌素水解成为6-APA和7-ADCA，它们是制备半合成β-内酰胺抗生素所需的关键中间体。

因此，青霉素酰化酶在医药工业中扮演了极为重要的角色，在生产新型抗生素方面有着较高的应用价值，本课题的主要研究目的，就是筛选获得一株青霉素酰化酶，并对其编码基因进行克隆表达。

青霉素酰化酶的来源及分类 青霉素酰化酶最初是从黄青霉Q176 (Penicillium shrysogenum)和米曲霉(Aspergiluus oryzae)中分离得到的[3]。

如今已在多种微生物中发现有青霉素酰化酶的存在，如细菌、放线菌、真菌、酵母等[4-5]。

产生青霉素酰化酶的细菌有很多，可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。

前者通常产生的是胞外酶，存在于巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)[6]和粘节杆菌(Arthrobacter viscosus)[7]等；而革兰氏阴性菌则是胞内酶，存在于大肠杆菌(Escherichia coli)[8]、粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)[9]、无色杆菌木糖氧化属(Achromobacter xylosoxidans)[10]、嗜柠檬酸克吕沃氏菌(Kluyvera citrophila)[11]、雷氏普罗威登斯菌(Providencia rettgeri)[12]和假单胞菌属(Pseudomonas sp.)[13]等。

青霉素酰化酶根据催化底物的优先性不同，可分为三类，如表1-1所示。

表1-1 青霉素酰化酶的类型Tab. 1-1 The type of penicillin acylase类型 催化底物 底物结构式青霉素G酰化酶 青霉素G 青霉素V酰化酶 青霉素V 氨苄青霉素酰化酶 氨苄青霉素 基因的克隆基因克隆是通过体外重组技术将一段目的DNA经切割，连接插入适当载体，并导入受体细胞，扩增形成大量子代分子的过程。

基因克隆的核心是体外重组（Recombination）即人工将一段目的DNA插入一个载体的过程。