多糖修饰载体在固定化脂肪酶中的应用文献综述
2021-09-27 00:12:54
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文献综述
一、前言
酶的固定化是指利用物理或化学的方法,将酶固定在水不溶性的载体上,使其在一定的空间范围内能进行催化反应的过程。常用的固定化方法有包埋法、吸附法、交联法结合法和热处理法等等。酶固定化后一般稳定性增加,极易与底物、产物分离,简化了纯化工艺,降低成本;可重复使用,缩短反应周期;酶反应过程能够加以严格控制,可以增加产物收率,提高产物质量。但是应用方面的基础研究仍然滞后,生产中更是缺乏
理论指导,特别是酶易失活及热稳定性差的缺点,极大地限制和影响到其优越性的体现与发挥。因此,提高酶的热稳定性、延长其储藏寿命就成为一个亟待解决的课题。目前国内外相关方面的研究,主要有四个方面即添加剂对酶的保护作用[1]、蛋白质分子化学修饰[2]、蛋白质变性研究[3]和嗜热有机体中酶的研究[4]。
二、多糖修饰载体在固定化脂肪酶中的应用
2、1大孔树脂的概述
大孔树脂(macroporousresin)又称全多孔树脂,是由聚合单体和交联剂、致孔剂、分散剂等添加剂经聚合反应制备而成。聚合物形成后,致孔剂被除去,在树脂中留下了大大小小、形状各异、互相贯通的孔穴。大孔树脂在干燥状态下其内部具有较高的孔隙率,且孔径较大,在100~1000nm之间。大孔树脂大多为白色球形颗粒,是具有三维空间网状结构的高分子聚合物,其理化性质稳定,不溶于酸、碱及有机溶剂,对有机物的选择性较好,不受无机盐及强离子低分子化合物的影响。连接在树脂骨架上的功能基,可通过吸附、共价键、离子键、配位键、交联、微胶囊等形式将酶固定于树脂上,构成固定化酶。酶与树脂结合后的活性较稳定,各种树脂经过功能基改性都可以更好地与酶分子结合,提高树脂固定化酶的效率[5]。不同类型大孔树脂的极性、孔性结构有所不同,对酶的固定化效果也截然不同。目前,大孔树脂按其表面性质可分为非极性、中极性、极性和强极性几种类型,常用的有苯乙烯型、丙烯腈型及丙烯酸酯型等。
2、2脂肪酶的概述
脂肪酶(Lipase,EC3.1.1.3)即三酰基甘油酰基水解酶,它催化天然底物油脂水解,生成脂肪酸、甘油和甘油单酯或二酯。脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中,植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子。其基本组成单位为氨基酸,通常只有一条多肽链。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。脂肪酶在生物体脂代谢中不可缺少,在自然界中拥有丰富的微生物资源[8]。脂肪酶是一类具有多种催化能力的酶,可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应,除此之外还表现出其他一些酶的活性,如磷脂酶、溶血磷脂酶、胆固醇酯酶、酰肽水解酶活性等。脂肪酶不同活性的发挥依赖于反应体系的特点。
脂肪酶具有以下突出的特点:(1)在有机溶剂中稳定性好。(2)具有广泛的底物特异性。(3)高度的位置选择性和异构体选择性。(4)催化活性高。(5)副反应较少。(6)产生脂肪酶的微生物来源极其丰富等。基于脂肪酶的以上特点以及优势,它已广泛应用于食品加工、新型生物材料、生物传感器、生物医学、手性药物拆分等领域[9]。
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