诱导启动子及其突变体对目标基因表达和目标产物的生产产量影响的研究
本次研究目的：以色素相关基因为报告基因，以色素色度与产量为考察指标，以温度、接种量为考察变量，研究诱导启动子及其突变体对目标基因表达和目标产物生产产量的影响。
具体研究方法：
1、设计引物，扩增诱导启动子（trc）片段，合成或人工制作3个trc启动子突变体片段、扩增相关基因片段；
2、构建和组装不同的载体，并转化宿主；
3、观察色素相关基因表达的色素色度与产量等指标；
4、研究不同温度、接种量对观察指标的影响。
宿主细胞表达色素的过程中对外界刺激如温度的应答反应首先是在转录水平上的调控，是由启动子和与之相互作用的转录因子共同完成的，启动子（Promoters）是RNA 聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA 序列，它含有RNA 聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列。启动子能活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。启动子就像“开关”，决定基因的活动，包括起始时间和表达的程度。启动子不同或突变会增加或降低基因转录速率，进而影响目标产物生产产量。因此，选择和筛选优良的基因启动子对工业产具有重要的经济价值。
启动子按其转录方式分为：组成型，特异型，和诱导型启动子。由于信号刺激而具有转录活性的启动子称为诱导型启动子，其活化受物理或化学信号的诱导，具有增强序列，沉默序列或类似功能，，感受特异性诱导的序列都有明显的专一性，部分同时具有组织特异性表达的特点。诱导型启动子可以根据不同生长环境和阶段接受或者随时结束诱导信号的刺激，因而可以快速有效的控制转录的开和关。
诱导型启动子常见研究方法包括瞬间转化分析，，转基因稳定表达检测，缺失突变分析，点突变，EMSA技术等。在研究启动子尤其是诱导型启动子的功能，为了获得准确可靠的结果，通常采用转基因稳定表达的方法，就是构建启动子与报告基因融合的的表达载体进行遗传转化，通过分析不同条件下的转基因菌株的报告基因的表达状况来判断诱导启动子的活性。
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