开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
研究目的:
本研究以色素相关基因为报告基因,以色素度与产量为考察指标,以温度、接种量为考察变量,研究天然启动子及其突变体对目标基因表达和目标产物生产产量的影响。
研究意义:
启动子是RNA聚合酶识别、结合和开启转录的一段DNA序列,它的作用在于能够活化RNA聚合酶使其与DNA模板准确结合,从而能够调控基因的转录起始时间和表达程度。启动子的不同或突变会增加或者降低基因转录速率,进而影响目标产物的生产产量。一般在工业生产中,通过基因工程将目的基因导入宿主细胞获得目的蛋白,而启动子的强弱决定了产量的多少,因此,选择筛选优良的基因启动子对工业生产至关重要,具有重要经济价值。
研究方法:
1、设计引物,扩增天然启动子片段,合成或人工制作3个天然启动子突变体片段、扩增相关基因片段;
2、构建和组装不同的载体,并转化宿主;
3、观察色素相关基因表达的色素色度与产量等指标;
4、研究不同温度、接种量对观察指标的影响。
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