开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 研究背景：
胰岛素抵抗是正常剂量的胰岛素产生低于正常生物学效应的一种状态,指单位浓度的胰岛素其细胞效应减弱,即组织对胰岛素的敏感性下降,代偿性引起胰岛beta;细胞分泌胰岛素增加,从而产生高胰岛素血症。其实质为胰岛素介导的细胞糖代谢能力的减低。
胰岛素抵抗是糖尿病、高血压、肥胖症、动脉硬化等代谢综合征疾病代谢紊乱的基础，作为人类多种代谢疾病的病理生理基础、发病机制中的重要环节，备受关注。可用于治疗胰岛素抵抗的药物: A双胍类药物:主要包括苯乙双胍、二甲双胍和丁双胍,目前临床上使用最多的是二甲双胍,其余两种由于其副作用大,现在临床上基本不使用。B噻唑烷二酮药物：是强效的胰岛素增敏剂，可使Ⅱ型糖尿病胰岛素抵抗减轻33%，有罗格列酮、吡格列酮等 。
VEGF-B是血管内皮生长因子家族一员，目前经研究发现，VEGF-B在促血管生成、促进神经发生、神经营养和神经细胞的保护，同时在调节脂质代谢以及在胰岛素抵抗方面发挥着重要的作用。
本课题将具有脂肪静脉血管细胞靶向性的靶向肽与血管内皮生长因子-B（VEGF-B）通过一段连接肽连接，形成一种新的融合蛋白tPep-VEGF-B，经前期研究发现其有缓解胰岛素抵抗的作用。下面我们将进行其缓解胰岛素抵抗机制的初步研究。
- 研究目的及意义
初步探索新型融合蛋白tPep-VEGF-B缓解胰岛素抵抗作用机制。VEGF-B在Ⅱ型糖尿病治疗方面有着巨大的开发潜力，可能为糖尿病患者带来福音。
- 实验方案：
1．小鼠骨骼肌Q-PCR检测脂肪酸氧化相关基因变化
小鼠骨骼肌RNA提取→第一链cDNA的合成→实时定量PCR检测Cpt,Aco,Fas,Pparalpha;,Pgc-1alpha;等基因变化
2.western blot检测小鼠骨骼肌中AMPK信号通路相关蛋白变化
小鼠骨骼肌总蛋白提取→ SDS-PAGE电泳→转膜→洗膜→封闭→洗膜→分别孵AMPK,p-AMPK,ACC,p-ACC,CPT1B,beta;-actin蛋白对应一抗，4℃过夜→洗膜→孵二抗→洗膜→曝光
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