开题报告内容:
一、 课题背景
现代研究表明,蜈蚣具有抗肿瘤功效,对多种实体瘤均具有较好的疗效,本课题对分离自少棘巨蜈蚣的两种异喹啉类新化合物的抗肿瘤活性进行研究,两种新化合物分别为:3,8-二羟基异喹啉(1)和1-甲氧基-4,5-二羟基异喹啉(2)。测试新化合物对六种人类癌细胞株的抗肿瘤活性,并测定其对人类正常肝细胞L-02的毒性以研究其对肿瘤细胞特异性。深入研究化合物1-2对人类神经胶质瘤细胞U87的抗肿瘤作用机制,以评价他们作为潜在的抗神经胶质瘤药物的药效。
二、 课题研究目标
对分离得到的两种新异喹啉生物碱进行深入的抗肿瘤活性、肿瘤细胞特异性以及抗肿瘤作用机制的研究,对其成药性进行初步的评价。
三、 实验仪器及试剂:
全自动高压蒸汽灭菌锅,CO2细胞培养箱,倒置显微镜,超净台,酶标仪,小型离心机,电泳仪,VE-186转移电泳槽,恒温振荡器,台式冷冻型离心机,凝胶成像仪,封口机,pH计,恒温水浴锅,制冰机,多用脱色摇床,X-光片,硝酸纤维素膜(NC膜),聚偏二氟乙烯膜(PVDF膜)。
磷酸盐缓冲液(PBS),苯甲基磺酰氟(PMSF),胰蛋白酶,结晶紫,考马斯亮蓝R250,牛血清白蛋白(BSA),甲醇,乙酸,丙烯酰胺,甲叉双丙烯酰胺,甘氨酸,过硫酸铵(APS),三(羟甲基)氨基甲烷(Tris),二硫苏糖醇(DTT),NaCl,KCl,Na2HPO4,KH2PO4,脱脂奶粉,ECL化学发光试剂盒
四、 文献综述
少棘巨蜈蚣在中国大部分地区广泛分布。干燥的少棘巨蜈蚣作为一种传统中药有显著抗细菌、抗高血压和抗肿瘤作用。以前的研究表明,有学者从少棘巨蜈蚣中分离得到几种蛋白、脂肪酸和少量包含5-羟色胺和组氨酸的成分。据Moon SS报道,Jineol对五种人类癌细胞株有显著细胞毒性。然而,从少棘巨蜈蚣中分离出的化合物中,只有少量组分已经被阐明其抗肿瘤活性,至于其发挥作用的分子机制,则所知更少。异喹啉类生物碱(Isoquinoline alkaloids)是一类重要的,生理活性极强的生物碱,因其独特的结构,在抗肿瘤方面显示了较强的活性。自然界中异喹啉生物碱的总数已达千余种。可使用异喹啉类生物碱进行抗肿瘤治疗的疾病包括肝癌、白血病、视网膜母细胞瘤、乳腺癌、肺癌、膀胱癌及结肠癌等。其作用机制可能与抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞分化和凋亡有关。
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