一、课题背景Jagged2蛋白是Notch信号通路的配体之一。
Notch信号通路由配体、受体以及下游的DNA结合蛋白构成的连锁信号通路；配体包括Jagged1、Jagged2、DLL1、DLL3和DLL4等，受体包括Notch1、Notch2、Notch3和Notch4等，其下游蛋白有HES1和HES5等。
Notch通路的受体在邻近细胞产生的配体的活化作用下,通过一系列分子间的相互作用,精确地调控各谱系细胞的增殖分化。
近年来研究发现异常的Notch信号途径与某些肿瘤的发生有关,同时依据不同的组织或细胞背景,对肿瘤细胞的增殖、分化、凋亡等过程发挥不同的调控作用[1]。
目前关于Notch配体jagged1蛋白已有大量研究，但jagged2蛋白的相关研究还是较少。
本课题旨在解决得到阳性表达重组jagged2蛋白的CHO细胞株后，如何分离纯化得到高浓度的抗原蛋白。
得到的重组蛋白可以用于进一步评估jagged2在Notch信号通路中的生物学功能、如何引发或抑制与Notch相关的多种癌症、制备小鼠jagged2单克隆抗体用于肿瘤生物治疗等研究提供重组蛋白[2]。
二、研究方法收集含jagged2蛋白的无血清培养液，用Ni 螯合亲和层析、超滤过滤等方法分离纯化表达产物，获得高纯度的jagged2蛋白，使用SDS-PAGE电泳及Western Blot技术检验得到的jagged2蛋白正确及完整的表达。
三、实验内容1、大量表达jagged2蛋白得到阳性表达jagged2蛋白的CHO细胞株后，为了批量表达jagged2蛋白，从两个方面设计细胞培养方式：一是在培养基中继续增加不同量的G418（Geneticin,遗传霉素），二是采用流加培养的方式添加培养基。
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