文献综述
采用共沉淀法制备磁性壳聚糖微球,戊二醛做交联剂把脂肪酶固定在磁性壳聚糖载体上,分别使用扫描电子显微镜、傅里叶红外光谱仪、X射线衍射仪、振动样品磁强计、热重分析仪等对磁性壳聚糖微球进行表征分析,并检测了固定化酶的特性。结果表明,制备的磁性壳聚糖性能良好,与游离酶相比,固定化酶的最适pH,最适温度均有提高,对变性剂的耐受力,重复使用性都有较大幅度提高[1]。
脂肪氧合酶(LOX)能专一.催化氧化具有顺,顺-1,4-戊二烯结构的多元不饱和脂肪酸及其酯,生成具有共轭双键的氢过氧化衍生物。脂氧酶广泛分布于自然界动植物中,尤以大豆LOX的活力最高。LOX的代谢路径会形成小分子的醛、酮等挥发性物质,从而使豆制品具有豆腥味和酸败气味,此外其代谢产物能直接与营养成分如蛋白氨基酸结合,进而降低产品的食用和营养价值[2-5]
大豆L0X的分子量约为105 kDa,是一种单体酶。X衍射技术显示L0X-1有2个结构域,其中氨基末端结构域有146个氨基酸残基,羧基末端结构域有693个氨基酸残基。氢过氧化物具有高度的反应性,是重要的医药化工中间体[2-5],LOX的天然优势底物是亚油酸,可得到满意的产率(达80%以上)。酯类底物如亚油酸甘油酯、磷酸酯等,较亚油酸而言不是理想的底物,产率极低(通常不超过15%)。天然大豆油含有较高含量的不饱和脂肪酸亚油酸,且环氧大豆油是开发前景广阔的增塑剂和稳定剂,适宜作为酯类底物的模型。
LOX由于其分布广泛、催化效率高,是一种值得深入研究并开发的酶类。目前限制LOX大规模应用的瓶颈在于它稳定性较差,对于高温、有机溶剂或极端的pH极其敏感。国外在LOX固定化方面做了一些研究,但这些方法大多繁琐且不经济,未能大规模应用。若能找到一-种简单有效的提高LOX稳定性的保存方法,并具有较好的催化效率,将具有现实的工业意义。LOX的催化活性及其影响因素是研究者们较为关注的热点[6-9]
游离的脂肪酶在工业应用时存在分离纯化等困难,一般为一次性使用,很难回收利用,增加工业成本[10].固定化技酶不仅保持了游离酶的高效性和专一性,同时增加了酶对温度、酸碱、变性剂的耐受性,易于分离和重复使用,有效的降低了成本,已引起国内外学者的关注[11]。壳聚糖(CS)具有生物相容性、生物亲和性和无毒等特性,分子链上大量存在的羟基和氨基又使其易于进行化学改性,常被作为磁性高分子材料的“外壳”而应用于污水处理、医药和酶固定化等领域。磁性壳聚糖微球作为一种新型功能高分子材料,已作为载体被广泛应用于酶的固定化领域[12]
参考文献:
[1]王楠楠,张大准,董发才.磁性壳聚糖的制备及在脂肪酶固定的应用[J].化学研究,2017,28(2):247-253.
[2]NAVICHA WB,HUA YF,MASAMBA K,et al.Optimization of soybean roasting parameters in developing nutritious and lipoxygenase free soymilk[J].Journal of Food Measurement and Characterization,2017,39(11):1-10
[3]STEPHANY M, BADER S, SCHWEIGGERT U, et al. Lipoxygenase activity in different species ofsweet lupin (Lupinus L.) seeds and flakes[J]. FoodChemistry,2015,174:400-406
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