泮托拉唑钠及其异构体体外抑制H ,K -ATPase酶活研究
1、实验目的：
比较泮托拉唑钠及其异构体体外对质子泵的抑制作用强度，为临床使用提供依据。
2、背景：
泮托拉唑是苯并咪唑衍生物，为H /K -ATPase酶抑制剂[1]，能迅速穿过胃壁细胞膜,聚积在强酸性分泌小管中,转化为次磺酰胺类化合物,苯并咪唑衍生物与H/K-ATPase酶的巯基共价结合,形成二硫键,使质子泵失活,从而抑制中枢或外周介导的胃酸分泌。[2]对胃壁细胞泌酸最后通道的阻断，与以往临床应用的抑制胃酸药物H2受体拮抗剂相比较，作用位点不同且有着不同的特点，即夜间的抑酸作用好、起效快、抑酸作用强且时间长、服用方便，所以能抑制基础胃酸的分泌及组胺、乙酰胆碱、胃泌素和食物刺激引起的酸分泌。[3]
泮托拉唑钠存在右旋泮托拉唑钠、左旋泮托拉唑那异构体，其空间结构不同可能对其与H/K-ATPase酶的结合有不同影响。通过比较其对H/K-ATPase酶活抑制能力的强弱，或可为此种药物的临床研究提供参考。
3、实验设计及其原理：
本实验预计用孔雀绿-磷钼杂多酸显色法测定总磷含量，以此测定H/K-ATPase酶对ATP的利用情况，从而测定酶活。此法的原理为：在中性条件下用过硫酸钾使是试样消解，将所含磷全部氧化为正磷酸盐，在酸性介质中正磷酸盐与钼酸铵反应，经一系列反应后的物质与显色剂发生显色反应，测量其吸光度，由标准曲线算出总磷含量。本次试验将在酶标仪OD620下测定其吸光度。[4]由于H/K-ATPase酶对Mg离子和K离子具有依赖，故在反应体系中加入一定浓度的MgCl2和KCl。同时，利用缬氨霉素对K离子的捕捉作用，增加ATPase酶与K离子接触的概率。
计划按照公式（阳性吸光值-化合物吸光值）/（阳性吸光值-阴性吸光值）*100计算各化合物各浓度的抑制率，并使用GraphPad Prism 5软件分析数据，根据log(inhibitor) vs. normalized response—Varibale slope拟合曲线，求取IC50。
以上是毕业论文文献综述，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
