大黄药材的含量测定及指纹图谱的建立
大黄为四大常用的中药之一,始载于《神农本草经》,距今已有2000余年的药用历史。目前,全国 8000 多种中药制剂中约有 800 多种含有大黄。大黄别名有:将军、黄良、火参、 肤如、蜀大黄、牛舌大黄、锦纹、生军、川军。大黄为多基源药材,产地广,四川(甘孜、阿坝)、甘肃、青海、西藏(昌都)等省区均产;我国有大黄45个品种和2个亚种,但载入《中国药典》可以药用的只有3种,即掌叶大黄( Rheum palmatum L.)、唐古特大黄( Rheum tanguticum Maxim.ex Balf).及药用大黄( Rheum offcinale Baill)干燥的根和根茎,前两种习称“北大黄”,后一种习称“南大黄”。大黄炮制品多,《药典》收载四种大黄饮片为:大黄、酒大黄、熟大黄、大黄炭。《神农本草经》中记载:大黄,味苦寒,归脾、胃、大肠、肝、心包经。大黄具有泻热通肠,凉血解毒,逐癖通经的功效。酒大黄善清上焦血分热毒。熟大黄泻下力缓,泻热解毒,用于火毒疮疡。大黄炭凉血化癖止血。据文献报道,大黄的有效成分主要为蒽醌类化合物,其中游离蒽醌衍生物以大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素为主,为大黄的抗菌成分;结合性蒽醌衍生物系大黄的主要泻下成分,其中以双蒽醌-番泻苷A、B 作用强。
中药指纹图谱(fingerprinting of Chinese drugs)是参照DNA指纹图谱发展而来的。指纹图谱是应用DNA分子标记技术,通过比较植(动)物来源的中药材不同种间、不同居群间DNA图谱的共性与差异,用于中药材的品种、种下分类、亲缘关系以及道地性的鉴定。目前,应用最多的则是中药化学指纹图谱(chemical fingerprint),它是利用中药中次生代谢产物(化学物质,或称化学成分)的多样性,应用色谱与光谱技术可以得到一组反应其次生代谢产物的图像,通过比较不同样品间这些图像的共性与差异,用于中药的品种鉴定与品质评价。
- 拟研究问题
1.1 在大黄药材原有化学成分研究的基础上,采用高效液相色谱法,应用二极管阵列检测器,测定大黄药材中中药指标性成分的含量。
1.2 应用高效液相色谱法研究不同产地大黄药材指纹图谱,分析比较共性与差异。
- 课题内容
2.1研究手段
中药粉碎机、Sephadex LH-20、硅胶柱、旋转蒸发仪、恒温水浴锅、热回流装置、离心沉淀机、高效液相色谱仪
2.2供试品溶液制备
取大黄药材,粉碎过筛。加无水乙醇,热回流,离心沉淀,合并上清液蒸发浓缩至膏状。分别精密称取一定量,甲醇定容,微孔滤膜过滤于进样瓶中。
2.3 对照品溶液制备
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