研究背景
肝脏是参与人体代谢、解毒、生物转化的重要器官，负责合成并贮存人体所需的营养物质，是人体内最大的反应工厂，分解体内毒素，合成糖原蛋白脂肪酸等，代谢药物，调节血液循环，是人体是否健康的指标性器官。因此，肝脏疾病严重影响人类生活和健康。在我国，诱发肝脏疾病的首要因素是病毒性肝损伤，其次是药物性肝损伤、自身免疫性肝损伤、酒精性肝损伤和脂肪性肝炎等，患者多表现为肝脏功能的进行性减弱，从肝炎到脂肪肝到肝纤维化，最终可能引起肝硬化、肝癌以及肝功能衰竭，严重威胁人类健康[1]。各种损肝因素和细胞因子和慢性感染共同引起肝脏损害和炎症后，静息状态下的肝星状细胞的活化并向肌成纤维细胞转化，转化生长因子TGF-beta;的表达便逐渐增强，TGF-beta;/Smad3信号传导通路启动，激活，促进肝组织中ECM增多，肝纤维化即发生。因此，在肝损伤的治疗中，积极探索逆转肝纤维化的治疗显得尤为重要。
通过统计发现，药物性肝损伤是目前急慢性肝病的主要诱发因素，药物在肝内主要经过Ⅰ相代谢(形成活性药物分子) 、Ⅱ相代谢(结合或解毒)及Ⅲ相代谢（排泄）中，药物经过细胞色素P450 ( cytochrome p450 protein，CYP) 代谢可形成如电子基、 氧自由基等有害活性基团，若代谢产生的毒物数量远超过肝脏的解毒功能最大负荷，则该药物可以诱导肝损伤，引起肝病[2]。诱发药物性肝损伤的经典药物是四氯化碳，CCl4 诱导的肝损伤能准确地反应肝细胞功能、形态及代谢上的变化，操作简便且经济。CCl4损伤机制除了常见的自由基导致的氧化应激反应[3]，还有TNF-alpha;[4]、白介素[5]等炎症因子引起的炎症反应，在炎症过程中，淋巴细胞、单核巨噬细胞等都表达TGF-beta;，TGF-beta; 通过调节免疫细胞的增殖、活化及分化抑制炎症反应[6]。
在CCl4损伤机制中，出现TGF-beta;的表达增强， 而TGF-beta;是一种重要的促纤维化细胞因子，这提示，在各种损伤因素引起肝脏损害和炎症后，肝损伤可能向肝纤维化转变，或者是启动了TGF-beta;的信号通路。肝纤维化发生中心环节是肝星状细胞被活化并向肌成纤维细胞转化，同时合成大量的细胞外基质，与环境及多种细胞因子相互作用引发肝纤维化，加重肝损伤[7]。有研究发现[8]，给予新鲜分离的小鼠原代肝细胞CCl4后可以检测到波形蛋白、I 型胶原蛋白等间质细胞标志物的表达增强，于是，我们猜想，急性肝损伤可能启动了EMT过程来促进肝纤维化，通过EMT使肝细胞转化为间充质细胞。
目前，在已有的体外肝毒性评价模型中，原代肝细胞的体外培养模型最接近体内肝细胞的状态，能够较准确的模拟体内肝损伤状态，能够快速、可靠地对药物进行临床前安全性评价，减少动物伦理问题，也是目前使用最广泛的一种体外肝毒性模型[9]。同时，本实验也将采取小鼠腹腔注射处理的方法研究CCl4对肝细胞的损伤，用来检测水通道蛋白1（AQP1）在损伤组织中的表达。本研究选取原代大鼠肝细胞，通过四氯化碳建立体外肝毒性模型，并在蛋白水平研究其损伤机制，探讨肝损伤与EMT之间的关系，以期进一步丰富肝损伤机制，为临床上用药提供理论依据。近年来，关于水通道蛋白的研究也越趋火热，本实验也将探讨水通道蛋白在肝损伤组织中的表达。
参考文献
[1] Hen ZJ. Epidemiology and natural history of alcoholic liver diseases[J]. Journal of China Prescription Drug, 2010,94(1):32-34.]Bjornsso等［BJORNSSON E S， BERGMANN O M， BJORNSSON H K，et al．Incidence， presentation， and outcomes in patients with drug-induced liver injury in the general population of Iceland［J］．Gastroenterology,2013,144(7):1419－1425．
[2] TENG GJ,SUN Y,CHANG BX,et al．Pathogenic mechanism and influencing factors of drug-induced liver injury[J].Chin Hepatol,2012,16(6):497－500.( in Chinese)
[3] ROSILLO M A, SANCHEZ-HIDALGO M, CAacute;RDENO A, et al. Protective effect of ellagic acid, a natural polyphenoliccompound, in a murine model of Crohnrsquo;s disease [J]. BiochemPharmacol, 2011, 82(7): 737-745.
[4] LIN X, HUANG R, ZHANG S, et al. Methyl helicterateprotects against CCl4-induced liver injury in rats by inhibiting oxidative stress, NF-kB activation, Fas/FasL pathway andcytochrome P4502E1 level [J]. Food Chem Toxicol, 2012, 50(10): 3413-3420.
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