开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
背景
长期高胆固醇饮食引起慢性的、自发的炎症反应，显著地导致包括结肠癌在内的健康问题。炎症小体可以调节肠道的稳态，而它的失调会导致炎性肠道疾病和结肠炎相关的癌症。IL-1beta;是一种有效的促癌细胞因子，它的产生由炎症小体复合物调节。目前已经发现的炎症小体中，NLRP3炎症小体研究的最多。近期的发现表明，胆固醇是一个有效的炎症小体配体。
研究方法
1.细胞培养
人THP-1细胞培养于添加10%高温灭菌的小牛血清的RPMI 1640培养基中，经PMA（100ng/ml）刺激12小时，分化为巨噬细胞。骨髓中巨噬细胞（BMDM）分离于C57/BL6小鼠和NLRP3小鼠，并用加入了10%高温灭菌的小牛血清和30%L929细胞选择培养基的DMEM进行培养。每三天更换一次新鲜培养基。7天内获得贴壁的巨噬细胞，而未贴壁的细胞由PBS洗板两次清除。贴壁的巨噬细胞用于实验。所有的细胞系在37℃、5%（v/v）湿度的CO气体中培养。
2.ELISA
取待测细胞培养的上层物质，离心后上清严格按照Elisa 试剂盒进行，以空白调零，检测各孔光密度D( lambda;) 值。
3.免疫印迹法（Western Blot）
检测用12%SDS-PAGE分离蛋白并用半干转移系统转移到聚偏氟乙烯（PVDF）膜上。用特定的抗体在4℃下检测过夜，后用HRP-结合的第二抗体在37℃下检测1小时。所有的这些抗体均用含1%BSA的PBST稀释。免疫印迹上的HRP用增强化学发光试剂进行检测，并且用薄膜进行条带的显像。条带用Quantity One software定量分析，并且相关蛋白水平以beta;-actin作为标准。
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