马尾松针中黄酮类化合物的测定文献综述

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

马尾松松针为松科（Pinaceae）松属（Pinus）马尾松（Pinus massoniana Lamb.）的针叶，别名猪鬃松毛、松毛、山松须，广泛分布于江苏、浙江、安徽、河南及长江中下游各省山地。松针用药历史悠久，最早记载于《名医别录》上品卷一松叶，其味苦温，主治风湿痹气，生毛发，安五脏，守中，不饥，延年。现代研究表明，松针具有镇痛、抗炎、镇咳、祛痰、抗突变、降血脂、降血压、抑菌等作用，并广泛应用于治疗风湿病、心脑血管疾病、糖尿病、肥胖病等症^[1-3]。近年来，国内外学者对松针的化学成分进行了深入研究，从中分离得到多种黄酮及其苷类^[4]、木脂素类^[5-8]等。有研究表明，松针中黄酮具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂等多种生理功能^[9-10]。当前，有关松针的研究主要集中在提取工艺以及粗提物药理活性等方面^[11-13]，而关于松针中总黄酮的纯化工艺未见有报道。本研究旨在寻找具有一定选择性、吸附容量大且易于解吸附的树脂，为分离纯化松针总黄酮，充分开发利用松针资源提供依据。

天然植物黄酮类物质具有消炎、消肿、降压、降血脂以及清除氧自由基等多种重要的生物活性。许多黄酮类物质提取物已在食品、药品、化妆品等产品中得到广泛运用，因而各种植物黄酮类物质提取分离、分子结构鉴定及功能作用等是近年研究的热点之一。

马尾松是我国亚热带南部潮湿地区分布最广、资源最大的树种。松针用药历史悠久,《本

草纲目》记载:松针,气味苦、温、无毒,久服令人不老,轻身益气,主治风湿疮,生毛发,安五脏,守中,不饥延年.现代研究表明,松针具有镇痛、抗炎、镇咳、祛痰、抗突变、降血脂、降血压、抑菌等作用,其利用价值日益受到重视近年来关于对马尾松针中的活性成分的研究已有不少报道，但对其黄酮类物质的研究并不是很多。松针是一种常用的中药，可用做禽畜的饲料添加剂，能促进禽畜生长、提高抗病能力。松针中含有许多有益健康的营养物质，如氨基酸、黄酮等。本课题主要针对马尾松针中黄酮类化合物的提取方法和分析方法进行研究，为松针及其相关产品的质量控制提供参考。

一、各物质的准备与配制

1.1样品中黄酮类物质的提取

用分析天平精密称取马尾松，加入合适浓度的乙醇溶液在适当的温度下提取，合并浸提液过滤，或者补足失重。取滤液部分，经石油醚萃取酯和色素后浓缩成浓缩液、浸膏，最后经过烘干即成成品；也可直接取滤液部分经过一定浓度的稀释后，直接进行紫外可见分光光度计的检测。

1.2芦丁标准储备液的配制

用分析天平准确称取已烘至恒重的芦丁标准品，用乙醇溶液定容至50ml容量瓶中，超声脱气，作为标准储备液。

1.3梯度标准溶液的配制

用移液管分别移取一定量的芦丁标准储备液至10ml容量瓶中，加入适量的显色剂，用蒸馏水定容至10ml，待用。

1.4显色剂的制备

5%亚硝酸钠的制备：称取5g亚硝酸钠，加入100ml蒸馏水溶解，待用；

10%硝酸铝的制备：称取10g硝酸铝，加入100ml蒸馏水溶解，待用；

20%氢氧化钠的制备：称取80g氢氧化钠，加入400ml蒸馏水溶解，待用。

注意：在加入显色剂时，需按照亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠的顺序依次加入0.4ml，0.4ml,4ml。

二、单因素考察实验

2.1对于适宜提取时间的研究

用分析天平精密称取马尾松0.5g，加入70%乙醇溶液40ml，在90℃的水浴锅上分别回流提取2.0h，2.5h，3.0h，3.5h，4.0h。冷却后补足失重，过滤，各取滤液1ml至10ml容量瓶中，依次加入显色剂，用蒸馏水定容，进行紫外可见分光光度计检测。

2.2对于适宜乙醇浓度提取的研究

2.3对于适宜乙醇体积提取的研究

2.4对于适宜提取温度的研究

2.2-2.4中却采用相似方法对不同的方面分别考察。

三、正交试验

分别取2.12.4中的最佳方案，并分别取每个方案中的前后两组条件再进行试验，通过正交表选取试验条件。选出的最佳条件再进行两组验证。

四、LC进行检测

配制出适宜的流动相，将黄酮提取液处理，进行HPLC检测，考察上述实验的操作方法及实验条件是否比以往的方法优化。

五、结语

本次实验的目的主要针对马尾松针中黄酮类化合物的提取方法和分析方法进行研究，优化建立松针总黄酮的提取方法，考察LC测定黄酮类化合物的条件。通过新的优化方案，可以使我们更好地从马尾松中提取出高品质的黄酮。

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