1.实验目的
本周蛋白(BenceJonesprotein)是一种单克隆游离型轻链，由于异常浆细胞过多繁殖时，产生轻、重链失衡导致轻链产生过剩所致。早在1845年英国内科医生兼化学病理学家HenryBenceJones首先在一位骨髓瘤患者尿中发现该蛋白质故而名之。该蛋白质的特征是具有特殊的热沉淀性质，即加热到4560℃出现凝固沉淀，继续加热至85100℃时沉淀再溶解，冷至4560℃时，沉淀又出现。现已证实，本周蛋白由完整的琯轻链(K或入，两者必居其一)组成。本实验主要通过一些理化手段，在对其理化性质充分掌握的基础上，先对本周蛋白进行分离纯化，再研究其生物学活性。
2. 实验方法
2.1 轻链免疫球蛋白的分离纯化
2.1.1 粗品提取
将新鲜病人尿液，加入硫酸铵至70%（百分比） 沉淀物加入蒸馏水溶解 经millipore超滤离心管离心（滤膜分子量为10 KD），取分子量大于10 KD的超滤液
2.1.2 粗品的纯化
2.1.2.1 离子交换柱层析
采用DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析进行纯化，将 MW大于10KD 的超滤液加至已用0.01mol/L PBS (pH7.6)缓冲液平衡的 DEAE-Sepharose Fast Flow柱上（规格phi;1040cm），用相同的平衡液洗涤未结合的杂蛋白，流速 24 ml/h，洗涤 2 倍柱体积后，用含 0～0.5mol/L NaCl 的平衡缓冲液梯度洗脱，流速 48 ml/h，洗脱 5 倍柱体积，分段收集洗脱峰。10%SDS-PAGE鉴定收集的目的蛋白。
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