澳洲茄胺衍生物抗炎和抗增殖活性筛选实验文献综述

 2023-01-29 21:03:49

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

研究背景:

癌症已经成为当今世界威胁人类健康的主要疾病之一,根据中国卫生部公布的最新统计数据显示:我国癌症发生率正处于快速上升期,每年新增病例260万,有180万人去世,癌症已经成为中国城市和农村居民的第一死因。研究开发抗肿瘤药物任重道远。

研究发现,甾体糖苷生物碱是一类重要的天然产物,具有良好的抗肿瘤、抗真菌、防治心血管疾病等药理活性,广泛分布于高等植物和一些海洋生物中,是一类重要的药物资源。其活性不仅与苷元有关,而且与糖链部分有着密切的联系。糖链中单糖组成、连接方式、糖苷键的构型等都直接影响甾体糖苷生物碱的生物活性。

澳洲茄胺是一种重要的甾体生物碱,从茄属植物的绿色果实中提取得到。澳洲茄胺可与不同的配糖及数目不等的配糖结合形成各种糖苷生物碱,澳洲茄边碱和澳洲茄碱这两种糖苷生物碱是澳洲茄胺在植物体内存在的主要形式。近年来国内外不少文献报道,澳洲茄胺及其糖苷类生物碱具有多重药理作用,研究表明澳洲茄胺具有抗真菌活性、抗炎镇痛活性、清除自由基作用,而更重要的是它具有是较强的抗肿瘤活性。糖链中单糖组成、连接方式、糖苷键的构型等都直接影响甾体糖苷生物碱的生物活性。研究发现澳洲茄胺不但能抑制人骨肉瘤细胞的增殖,也能诱导肿瘤细胞凋亡。本项目主要针对这些澳洲茄胺衍生物的抗炎抗增殖活性进行筛选,并且利用筛选出的活性较好的衍生物进行其抗肿瘤机制的研究,从而为更有效地防治肿瘤提供科学依据。

一氧化氮(NitricOxide,NO)是一种自由基性质的气体小分子物质,由血管内皮细胞释放。NO作为信使物质或效应分子在体内发挥极其重要的生理功能,其生成不足或信号传导异常与多种疾病的形成和发展密切相关,设计和研究与NO相关的药物正是在上述背景下应运而生的新药研究策略。NO在调节细胞凋亡时有双重作用,即低浓度的NO通常保护细胞不被凋亡,并且促进细胞的生长和分化,而高浓度的NO具有细胞毒性,能够诱导细胞凋亡。已有研究表明,NO在血管生成中起着促进或抑制作用,并在肿瘤病理过程中存在NO介导的肿瘤毒性,并在肿瘤血管形成、肿瘤浸润和转移过程中起重要作用。

研究方法:

1.LPS诱导RAW264.7产生NO的抑制作用研究:

RAW264.7细胞用DMEM培养基加10%血清在37℃,5%CO2培养箱进行培养。分组情况如下:正常对照组、模型组(100ng/mlLPS)、阳性对照组(地塞米松)、母核对照组(澳洲茄胺)、受试化合物组(2.580mu;M 100ng/mlLPS)。每组设3个复孔。细胞生长至对数期后,以3105个/ml的密度接种至96孔板,于培养箱内常规培养。细胞增殖至80%融合时,加入不同浓度的化合物预处理2小时,随后加入100ng/ml的LPS进行诱导。24及36h后,用Griess法试剂盒按照说明书进行NO含量测定,酶标仪550nm下测OD值。

2.对3种肿瘤细胞增殖的抑制作用研究:

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