- 立题背景及研究现状
血管内皮细胞(vascular endothelial ce11, VEC)是铺陈于血管壁内侧的一种多功能的单层扁平细胞，是影响血管壁通透性的主要屏障，对血栓与止血、炎症与免疫和血管新生、物质转运等多种生理、病理过程具有重要的调节功能，能直接影响血管壁的稳定和功能健全[1]。
细胞凋亡(apoptosis，APO)是由细胞内特定基因操纵、调控的一种生理性或病理性的自杀性细胞死亡方式。细胞凋亡的现象广泛存在于心血管疾病的发生发展过程中，是细胞损伤的特征性病理生理变化。当凋亡触发因子作用于VEC时，细胞内出现多种调控基因表达改变、蛋白酶活化等一系列的变化，井出现胞膜泡状突起，染色质浓缩、细胞核裂解以及膜分子结构和功能等的改变，从而参与血栓形成、动脉粥样硬化、高血压等多种病理过程[2]。在心脑血管系统疾病中，尤其是动脉粥样硬化类疾病中，普遍存在血管内皮细胞凋亡异常现象，干预血管内皮细胞凋亡、保护心血管已成为当今心血管药理研究的一个新方向。
山绿茶为冬青科冬青属植物海南冬青(Ilex hainanensis Merr.)的干燥叶，具有清热解毒、平肝潜阳、活血化瘀的功效。现有的山绿茶制剂主要有山绿茶片剂及山绿茶胶囊，均为单味药制剂，主要用于防治高血压症、降血脂、降胆固醇、冠心病、脑血管意外所致的偏瘫、风热感冒等症[3]。冬青素A是一种乌苏烷型三萜衍生物，在冬青属植物中含量较高，是山绿茶的主要特征成分[4]。已有报道与冬青素A结构极其相似的乌苏烷型三萜衍生物熊果酸具有抗病毒性肝炎的作用，但冬青素A的药效与作用机制研究尚未见报道。鉴于市面上已售的山绿茶制剂，作为临床多用于高血压等血管性疾病的治疗，而冬青素A作为其主要活性成分，我们推测冬青素A有改善血管内皮细胞凋亡的作用，并对其作用机制进行研究。
- 研究内容，研究目标
2.1研究内容
①建立棕榈酸(PA)诱导人脐静脉内皮细胞（HUVECs）凋亡的模型；
②荧光法测定细胞凋亡的情况，并以流式细胞仪检测细胞凋亡率，以说明冬青素A对PA所致的血管内皮细胞凋亡的影响；
③荧光法测定细胞内活性氧（ROS)的荧光密度值，以说明冬青素A通过抑制氧化应激来改善内皮细胞凋亡；
④荧光法测定线粒体膜电位，以说明冬青素A通过改善线粒体功能紊乱来抑制内皮细胞凋亡；
⑤ELISA试剂盒测Caspase-3的活性。
2.2研究目标
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