二维色谱-质谱法在小核酸物质分析中的应用一、前言1995 年，美国康奈尔大学GUO 在研究一种线虫时，首次发现RNA 抑制现象。
1998 年，Fire[1]等对线虫进行阻断效应实验，发现双链RNA(doublest randed,dsRNA) 可特异性抑制特定基因的表达，此阻断效果比单用正义或反义RNA 强10倍以上，Fire 将这种由dsRNA引发的特定基因表达抑制现象称为RNA 干扰作用(RNA interference,RNAi)。
RNAi 是指通过反义RNA 与正链RNA 形成双链RNA 特异性地抑制靶基因的现象，通过人为地引人与内源靶基因具有相同序列的双链RNA (有义RNA 和反义RNA)，从而诱导内源靶基因的mRNA 降解，达到阻止基因表达的目的。
目前科学家已初步阐明RNAi 的作用机制，认为此过程主要分为三个阶段: 启动、剪切、倍增。
siRNA 是RNAi 作用赖以发生的重要中间效应分子，它是长21~23nt的dsRNA 特征性结构，即siRNA 的序列与所作用的靶mRNA 序列具有同源性，siRNA两条单链末端为5端磷酸和3端羟基，此外每条单链的3端均有2~3个突出的非配对的碱基，使siRNA 不同于其他小dsRNA,是细胞赖以区分真正的siRNA 和其他dsRNA 的结构基础。
ATP 在siRNA介导的RNAi 中具有重要作用: 较长dsRNA 向siRNA 的转变需要ATP 参与,siR-NA 双链结构解旋并列成有活性的RISC 也依赖于ATP。
此外，ATP使siR-NA的5端带上磷酸分子，可能充当靶RNA 裂解的一种分子参照。
siRNA技术可以方便地阻抑特异性基因，受抑制的基因可以是内源性基因，也可以是外源性基因。
内源性基因如癌基因或与疾病相关的基因，外源性基因如病毒基因，针对它们进行特异性阻抑，可应用于临床基因治疗或开发新型药物等方面的研究[2]。
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