开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、主要研究内容、预期成果:
主要研究内容:抑郁症是一种多病因的精神疾病,在全球人口中普遍存在。重度抑郁症的核心症状包括兴趣缺乏、食欲减退、烦躁不安和思想功能障碍。当前抗抑郁药物主要针对单胺能系统、5-羟色胺(5-HT)或去甲肾上腺素不足为疾病的主要原因。然而,大部分抑郁症患者无法治愈(汉密尔顿评级评分le;7),只有30%的患者可缓解。因此,我们需要深入了解抑郁症的病理生理机制,以开发新的有效方法来治疗抑郁症和相关的情绪障碍。
大量研究表明,神经炎症与抑郁样症状和神经心理障碍有关,半胱氨酸白三烯受体1 (Cysteinyl Leukotriene receptor 1,CysLT1R)被报道参与影响神经炎症。CysLT1R的病理生理作用已在几种脑损伤中得到证实,然而,CysLT1R在抑郁症中的作用仍有待阐明。
基于以上背景,本研究将探讨海马CysLT1R下调对慢性轻度应激(CMS)小鼠抑郁行为的影响,以C57/BL6小鼠为研究对象,构建星形胶质细胞特异性表达CysLT1R-shRNA序列的腺相关病毒载体 (AAV-GFAPpro-CysLT1RshRNA-EGFP),将其注入小鼠双侧海马齿状回(1mu;l/site),以敲减此脑区星形胶质细胞半胱氨酰白三烯受体1(Cysteinyl leukotrienes receptor 1,CysLT1R),采用慢性温和应激(CMS)诱导小鼠抑郁样行为,检测海马CysLT1R蛋白及mRNA的表达水平,观察小鼠的自发活动,评价小鼠抑郁样行为,并取脑海马组织检测炎症因子的表达水平。
预期结果:敲减海马星形胶质细胞CysLT1R能够缓解小鼠的抑郁样行为。
二、拟采用的研究思路(研究方法、技术路线、可行性论证):
研究方法:首先,实验选用6-7周龄的C57/BL6小鼠作为研究对象,将小鼠随机分组,适应性饲养一周后,采用脑立体定位微注射技术将病毒载体注入小鼠双侧海马齿状回(1mu;l/site),以敲减此脑区星形胶质细胞半胱氨酰白三烯受体1(Cysteinyl leukotrienes receptor 1,CysLT1R)。采用慢性温和应激(CMS)诱导小鼠抑郁样行为,通过Western blot与RT-PCR技术检测海马CysLT1R蛋白及mRNA的表达水平。采用旷场实验(Open field test,OFT)观察小鼠的自发活动,采用强迫游泳实验(Forced swimming test,FST)、悬尾实验(Tail suspension test,TST)、糖水偏好实验(Sucrose preference test,SPT)评价小鼠抑郁样行为,并取脑海马组织检测炎症因子的表达水平。
技术路线:
免疫印迹实验
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