中药功劳木不同部位的指纹图谱及抗乙酰胆碱酯酶活性的谱效关系研究文献综述

选题目的和意义：

阿尔兹海默病（AD）是一种病因未明的原发性退行性脑变性疾病，给社会和家庭带来了巨大负担，已是全球的一个健康难题。乙酰胆碱酯酶抑制剂作为美国FDA唯一获批的治疗AD的药物，存在一定的治疗效果，但作用时间相对短且常常伴有一些副作用。中药近年来在AD的预防和治疗中有较好的前景，且具有毒副作用低，副作用小等多种潜在的优势。故深入挖掘中药抗AD作用，并从中发现潜在活性化合物显得尤为重要。

国内外研究状况及发展趋势：

在进展期间AD中，大脑皮质中神经细胞的死亡导致大脑萎缩。 结果，在颞叶和海马中产生间隙，其中存储和检索新信息。这些病变会影响记忆，思考，说话和决策的能力脑处理速度和记忆由神经递质乙酰胆碱（ACh）决定。低水平的ACh导致学习和记忆受损以及一般的“慢思维”。此外，ACh的缺乏似乎与AD直接相关[4]。 ACh的水平与健康患者相比，患AD的患者的大脑大大减少。迟到了在AD阶段，ACh水平下降了多达85％[5]。这种减少是由于无法实现的合成足够的ACh以充分传输信息。此外，ACh被打破了在乙酰胆碱酯酶（AChE）的突触间隙中。因此，提高ACh水平的一种方法大脑是抑制AChE。 ACh的分解减少，并且更多的ACh可用于结合ACh受体导致认知功能的改善[6,7]。 AChE抑制剂仍然是第一个选择用于治疗AD的药物。使用AChE抑制剂加兰他敏和利凡斯的明在轻度至中度的疾病阶段;多奈哌齐是所有阶段的首选药物。这种疗法不再被认为只是症状，而是疾病的改变[8,9]。另一种选择是美金刚，是N-甲基-D-天冬氨酸受体的拮抗剂，用于中度以单一化合物或与多奈哌齐组合的AD严重病例。所有的这些疗法可以改善患者的生活长度和生活质量，它们只是对症治疗的未能治愈这种疾病各种植物来源的化合物已经用于治疗AD。最突出的

例如毒扁豆碱，加兰他敏（Reminylreg;）和石杉碱甲，但超过150种不同各种制剂和混合物中的植物物种已用于与年龄相关的CNS疾病[12-15]。我们还已经显示出桃蚜类的抗AChE活性，即单萜烯来自Taxus baccata [16]。因此，可以假设植物仍然是有前途的来源具有抗AChE活性的新型生物活性化合物。

功劳木作为正名收载，规定其来源为小檗科植物阔叶十大功劳 Mahonia bealei (Fort.)Carr.、细叶十大功劳 Mahoniafortunei (Lindl.) Fedde. 的干燥茎。功能主治清热燥湿，泻火解毒。用于湿热泻痢，黄疸尿赤，目赤肿痛，胃火牙痛，疮疖痫肿[7]。功劳木中含有大量的生物活性物质如生物碱、黄酮类、挥发油和苯丙素类化合物等，具有抗菌消炎，抗肿瘤，抗病毒[8]，抗老年痴呆[9] 等诸多药理作用。该药材在市售诸多药物中均扮演着君药或臣药角色，如功劳去火片，妇科千金片，胃肠适胶囊，痔疮片[10] 等。因其市场需求，使得该药材也越来越受到关注。

现有的质量控制方法主要采用薄层色谱和液相色谱法对其中盐酸小檗碱和盐酸巴马汀进行测定，这样的标准是远远无法准确地反映其量效关系。深究其主要原因，是对发挥药效的物质基础及活性成分不明确、导致质量控制标准不规范，从而无法建立完善的质量评价体系。

故通过功劳木指纹图谱分析与体外药效相关性分析，无疑为功劳木中发挥抗AD活性的成分群发现提供一种科学的思路，同时为药典中功劳木的标准提高，提供可靠的数据支撑。

研究基本内容：对功劳木进行指纹图谱分析，确定有效活性成分。采用改良的Ellman 方法探究活性成分对乙酰胆碱酯酶的抑制作用，通过测定活性化合物在不同浓度下的抑制率来计算其半数抑制浓度IC50。之后进行功劳木提取物抗AChE的药效成分间的量效关系研究，依据FIC值的大小来判断药效成分间的量与效之间的关系。首先将活性化合物A，B，C的IC30计算出（利用spss软件中分析—回归—probit，即得）。后将化合物A逐级稀释后加入到96孔板中，后将固定浓度的化合物的IC30值加入到每孔中，按照AChE测定方法进行测定。并对FIC值进行测定。两种化合物的分级效应（fractional effect，FE）依次为FEA=IC50(A B)/IC50(A)；FEB=IC50(A B)/IC50(B)；FIC=FEA FEB；当FIC小于0.5时，两种药为协同作用；当FIC为0.5～1时，两种药为相加作用；当FIC大于1且小于2时，两种药为无关作用；当FIC大于2时，两种药为拮抗作用。

论文预期结果：提取功劳木中活性物质并进行量效分析，确定抑制乙酰胆碱酯酶的最佳方案。

进度安排：

2019/2/25--2019/3/4 确定论文题目，填写任务书

2019/3/4--2019/3/10 提交开题报告，翻译外文原文资料

2019/3/10--2019/4/8 提交周进展情况记录、中期检查表

2019/4/8--2019/5/20 完成毕业论文初稿

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