转录因子KLF4在细胞增殖、分化和命运决定中发挥着至关重要的作用，其在雌性生殖系统，尤其是在雌性生殖干细胞中的功能仍未完全阐明。
CRISPR/Cas9基因编辑技术作为一种高效、便捷的基因编辑工具，为研究KLF4基因在雌性生殖干细胞中的功能提供了新的思路。
本文综述了CRISPR/Cas9技术和KLF4基因的研究进展，以及CRISPR/Cas9技术介导的基因敲除细胞系的构建方法，并探讨了KLF4基因敲除雌性生殖干细胞系构建的研究意义和应用前景，为深入研究KLF4基因在雌性生殖系统中的作用机制提供理论参考。
关键词：CRISPR/Cas9；KLF4；雌性生殖干细胞；基因敲除；细胞系构建
近年来，基因编辑技术发展迅速，其中CRISPR/Cas9技术以其高效、便捷、成本低等优势，成为了生命科学领域的研究热点，并广泛应用于基因功能研究、疾病模型构建、基因治疗等方面[1-5]。
CRISPR/Cas9技术通过Cas9核酸酶在sgRNA的引导下，对目标DNA序列进行切割，进而实现基因敲除、基因插入或基因替换等操作[6-8]。
KLF4(Krüppel-likefactor4)是一种锌指结构转录因子，属于KLF家族成员，参与调控细胞增殖、分化、凋亡以及干细胞多能性维持等多种生物学过程[9-12]。
研究表明，KLF4在多种肿瘤的发生发展中发挥重要作用，其表达水平与肿瘤的恶性程度、侵袭转移能力以及患者预后密切相关[13-15]。
此外，KLF4还参与调控胚胎发育、组织再生以及免疫应答等过程[16-18]。
雌性生殖干细胞是维持雌性生殖系统功能的重要细胞群体，其具有自我更新和分化为卵母细胞的潜能，对维持女性生育能力至关重要[19-21]。
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