利用斑马鱼模式动物构建Hippo信号通路活体观察模型文献综述

 2023-02-15 18:46:17

开题报告内容:

一、研究背景:

近年来,在模式生物果蝇中发现了一个新的信号通路hippo信号通路,它能同时抑制细胞增殖和促进凋亡,在生长调节方面发挥着重要的功能。最近的研究己经部分了解到在哺乳动物中HIPPO信号通路调控细胞接触抑制、器官大小和肿瘤发育。在果蝇中,Hippo激酶级联效应最终拮抗转录共激活因子Yki,从而正向调控参与细胞生长、增殖和存活的靶基因的转录。哺乳动物YAP(Yki的同源物)能够在体挽救果蝇突变体,小鼠肝脏中过度表达YAP引起肝脏尺寸大幅度增加,在肠道过度表达YAP会扩大祖细胞池,鸡胚中过度表达YAP会导致神经祖细胞池显著扩大,这些现象显示了脊椎动物YAP在调控细胞增殖和存活方面的保守性。

Hippo信号通路在果蝇中被最完整的阐述,在不同的物种中该通路是高度保守的。其核心成份是YAP/TAZ等转录调控因子。信号通路的组成原件包括有Mst1/2、Sav、Lats1/2和Mob1等蛋白质。活化的Lats1/2-Mob1复合体可磷酸化Hippo信号转导通路的主要的下游靶点,转录辅助激活因子YAP。YAP与含有DNA结合结构域的TEA家族(TEAD)的转录因子相结合形成异源二聚体,激活Hippo信号转导通路的应答基因的转录,从而在转录水平上调控细胞的生长,扩増并抑制细胞调亡。本实验借助斑马鱼模式动物,该模式动物的基因与高等脊椎动物的基因有着较高的同源性,发育的机制也有较高的保守型。Hippo信号通路与许多方面都密切相关,对其进一步研究也有深远的意义,为了更好地,更直观的观察活体内源性Hippo信号通路表达的情况,以在体研究这个信号通路的功能,本课题旨在构建一个Hippo信号通路的转基因报告鱼系。

二、工作计划与主要内容:

第一阶段(1-3周):确定选题,查阅文献,学习基础实验操作

第二阶段(4-7周):候选基因的克隆与转基因质粒的构建

第三阶段(8-10周):斑马鱼胚胎注射及荧光观察

第四阶段(11-12周):整理数据,完成毕业论文

三、研究意义

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