开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
研究的内容:
虫草活性成分(虫草多糖(CPS))治疗慢性肾炎的作用机制。
研究的方法:
1)模拟人工胃液制备CPS样品,运用MTT法筛查虫草多糖活性片段及其抑制HMC增殖最佳剂量;
2)RT-PCR法检测不同浓度CPS(25、50、100mu;g/ml)预保护12 h对PDGF-BB(50ng/ml)刺激24 h后TNF-alpha;、TNFR1、TNFR2表达的影响,测TNFR1、TNFR2的表达水平,选定一个受体,Western Blot法检测其表达量;
3)RT-PCR和Western Blot法检测不同浓度CPS(25、50、100mu;g/ml) 预保护12h对PDGF-BB(50 ng/ml)刺激24 h诱导的TNF-alpha;、TNFR1和MCP-1表达的影响;
4)显微镜观察虫草抑制PDGF-BB刺激HMC形态改变作用;
5)ERK抑制剂作用下总erk1/2和p-erk1/2蛋白表达的影响进行ERK信号通路研究。
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