重组水蛭素(Ⅲ)对大鼠D-半乳糖性白内障防治作用文献综述

 2023-01-28 22:51:44

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

一、拟研究的问题及背景

白内障(Cataract)是发生在晶状体上的一种疾病,是目前全球范围内致盲的主要原因。流行病学调查表明,导致白内障的主要因素有:1、代谢性疾病:如糖尿病、半乳糖血症、半乳糖激酶缺乏症、6磷酸葡萄糖脱氢酶缺乏症、高色血氨酸血症等。2、药物或化学性中毒:如过量接触类固醇激素、氰酸盐、秋水仙碱等。3、物理性因素:如过量接受紫外线、红外线、电离辐射、微波等。

在白内障的发生过程中,均伴有晶体内的种种生化改变:如脂质过氧化加速,醛糖还原酶活性增高、超氧化物歧化酶及谷胱甘肽还原酶等活性降低,ATP 浓度下降,一些氨基酸、维生素及还原性物质减少,电解质平衡失调以及晶体蛋白聚合和结构性质改变等。因此,防治白内障的途径也是多方面的:如利用抗氧化剂或抗氧化激活剂以清除或中和紫外线、电离辐射、化学物质以及代谢产物等对晶体的有害损伤,通过补充维生素、辅酶(NADP) 、谷胱甘肽以及ATP 等,以减少晶体内的生化改变,通过封闭蛋白质的一些活泼基团,以保护蛋白质免受有害化学物质形成加合物而造成损伤。所以如果一个药物能使晶体内SOD 活力升高、MDA 含量下降,则认为该药对改善白内障是有益的。

水蛭素产生于水蛭的唾液里,当水蛭吸血时,将它分泌出来,阻止血液凝固。1954年,Markward从中药水蛭头部唾液腺中分离出水蛭素(hirudin)纯品,1955年Markwart从医用水蛭咽周腺体中成功地分离出水蛭素纯品,开始对其组成结构和理化性质进行研究。20世纪60年代进一步发展了天然水蛭素的分离和纯化技术,得出水蛭素由65个氨基酸残基组成,分子量为7KD。N端有3个二硫键,使N端肽链绕迭成密集形核心环肽结构。C端富含酸性氨基酸残基,具亲水性,游离在分子表面。肽链中部还有一个由Pro-lys17-Pro组成的特殊序列,不被一般蛋白酶所降解。但由于从水蛭中提出的天然水蛭素的量太少,限制了它的临床应用。近来,随着生物化学的发展,国内外已有若干实验室成功地应用基因工程方法获得相当量的结构、药理活性与天然水蛭素基本相同的重组水蛭素(recombinant hirudin,rH),从而推动了水蛭素的药理、临床等方面研究工作的深入开展。

水蛭素作为凝血酶的特异性抑制剂,有很强的抗凝活性,临床上多用于治疗不稳定型心绞痛(USA)、急性心肌梗死(AMI)、血管成形术、术后血栓形成、血液透析、体外循环、弥散性血管内凝血(DIC)。不少文献表明其还能通过眼部黏膜吸收用于防治白内障。本实验以现有文献为基础研究重组水蛭素(Ⅲ)对实验性白内障的影响,并探讨其防治机制。

二、研究目的

1.利用50%D-半乳糖造成大鼠糖性白内障;

2.掌握实验的检测指标(晶状体混浊度、SOD及AR活性、MDA含量)与统计方法(组间t检验)。

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