开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
1. 研究背景
原发性肝癌(hepatoeellular carcinoma，HCC)是一种常见的恶性肿瘤，其治疗效果不尽人意的原因之一是缺乏靶向性的药物。目前的诊断和治疗方法主要有手术、化疗、放疗、B超和CT等，生物治疗和诊断也是最有希望彻底治愈和有效诊断的途径之一[1]。
机体免疫功能下降和肿瘤细胞的增生是维持癌细胞恶性生长的主要原因[4]，而甲胎蛋白(alpha-fetoprotein ,AFP)能诱导淋巴细胞凋亡，导致机体免疫功能下降。A F P 在肝癌细胞生存过程中的作用机制可能很复杂，如今对AFP的研究也日益成为癌症治疗方面的焦点之一。
AFP是一种酸性糖蛋白，是胚胎期血浆蛋白的主要成分。目前AFP是原发性肝癌诊断和生物治疗的一种重要的靶抗原。甲胎蛋白的产生伴随胚胎的整个发育过程，出生后表达量下降，但是部分肝癌患者AFP表达量会有异常增高。研究显示:AFP由肝癌细胞分泌,又可促进肝癌细胞生长, 病理状态下可在80％以上的原发性肝癌患者的血清中升高，是目前肝癌生物治疗和诊断中用得最多的靶抗原[2][14]。
有实验表明，HCC患者外周血来源及骨髓来源的树突状细胞(Dendritic Cell , DC)均出现细胞因子分泌减少及共刺激分子表达的下降，其它类型肿瘤也有类似的报道。其可能的原因之一是肿瘤细胞的代谢产物抑制DCs功能，并诱导其凋亡[4][15]。
DCs是目前公认的体内抗原提呈功能最强的专职抗原呈递细胞（professional antigen presenting cell，professional APC），在机体抗肿瘤免疫及肿瘤的生物学治疗中具有十分重要的作用[3][6]。A F P 能通过改变D C s 的表现型，从而抑制D C s 向成熟的A P C 细胞转化，同时A F P 能诱导D C s 细胞和T 细胞凋亡。
单链抗体(single-chain fragment variable，scFv)是由免疫球蛋白的重链可变区(VH) 和轻链可变区(VL)通过一段连接肽连接而成的重组蛋白，它是具有完全抗原结合位点的最小抗体片段，分子量小，免疫原性低，容易进入肿瘤内部[5]，在非肿瘤组织中清除较快，又能与酶、免疫毒素或细胞因子等连接形成融合蛋白，或与化疗药物及放射性核素偶联，因而在肿瘤的诊断和治疗方面，比完整的鼠源性单克隆抗体具有更多的优越性。抗AFP的单链抗体进入体内后可与AFP结合,加速AFP的清除，在原发性肝癌的治疗和诊断中具有重要的作用。
2. 选题目的和意义
本课题拟采用前期构建好的重组大肠杆菌表达抗AFP单链抗体，经一系列纯化手段得到高纯度的单链抗体。以此抗AFP单链抗体对AFP凋亡DC细胞这一实验现象的影响证明其对AFP的拮抗作用。
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