甘油脱氢酶基因工程菌的构建文献综述

 2023-02-17 21:07:34

一、研究意义1,3-二羟基丙酮 (Dihydroxyacctone,DHA)是最简单的酮糖,是一种带有甜味的白色粉末状结晶,易溶于水、乙醇、丙酮和乙醚等溶剂。

二羟基丙酮分子中含有两个羟基和一个酮基,化学性质活泼,广泛参与如聚合、缩合等化学反应。

DHA是一种重要的精细化工产品,可作为农药合成中间体、精细化工原料和医药前体,用途广泛,市场潜力很大[1]。

本课题旨在以绿色荧光蛋白为筛选标记筛选高效转录的强启动子,通过基因工程手段建立甘油脱氢酶的高效表达载体,从而构建高效表达甘油脱氢酶的工程菌,在后续过程中促进甘油的转化,对提高二羟丙酮的生产水平具有重要意义。

二、研究现状1 二羟基丙酮生产研究进展当前的生产方法以化学合成法为主。

微生物发酵法更具经济和社会效益。

氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)可通过膜结合甘油脱氢酶将甘油一步转化生成DHA并快速释放到发酵液中,且生产性能稳定、转化率高,因此成为DHA微生物发酵生产中应用最多的菌株[2]。

在G. oxydans 菌中存在两条甘油氧化的途径:(1)甘油直接氧化成DHA,由不依赖于NAD 的膜系甘油脱氢酶催化,最佳pH 为6.0,然后DHA被激酶磷酸化成为磷酸二羟丙酮;(2)甘油被激酶催化成为甘油-3-磷酸,最佳pH 为8.5,然后被依赖于NAD 的脱氢酶氧化成为磷酸二羟丙酮,磷酸二羟丙酮通过PPP 途径分解代谢。

已有研究表明,甘油脱氢酶GDH 是二羟基丙酮合成过程中的关键酶,提高甘油脱氢酶的表达量将提高底物转化的效率[3]。

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