海南野扇花质量标准研究文献综述

一、课题背景

海南野扇花（Sarcococca vagana Stupf）为黄杨科野扇花属植物，又名大叶清香桂。灌木，高1-3米；小枝长而细瘦，常左右屈曲，有纵棱，无毛。叶坚纸质，椭圆状披针形、卵状披针形或椭圆状长圆形，长8-16(-20)厘米，宽4-6厘米，先端渐尖，基部短急尖，两面无毛，中脉下方一对粗大侧脉从离叶基5-7毫米处出发上升，成明显的离基三出脉，其余侧脉2-3(-5)对斜出、弓曲，末端和此一对大脉相联结，中脉及侧脉在叶面下陷，叶背凸出，叶柄长1-2厘米。花序短总状或近头状，长1-1.3厘米，花序轴无毛，苞片卵形，先端渐尖，长约1.3毫米，雄花约7-10，占花序轴的大部，各花相隔1-2毫米，雌花1-2(-5)，在花序轴基部；雄花：位于花序轴下部的，有长约1.2毫米的花梗，具2小苞，小苞片卵形，钝头，长0.8-1毫米，萼片4，外方的阔卵形或椭圆形，内方的阔椭圆形，长均2毫米，先端圆，有小尖凸头，不育雌蕊长方形，高0.5毫米．宽1毫米，但生花序轴上部的，花梗很短，无小苞片，萼片4-5；雌花：连柄长3-4毫米，小苞片卵形或卵状三角形，萼片和末梢小苞片形状相似。果实单生或两个同生一短轴上，球形，直径8-10毫米，宿存萼片阔卵形，急尖头，长1.5-2(-3)毫米，花柱2，先端向外反卷，果柄长4-6(-10)毫米。花、果期9月至翌年3月。生于海拔500-800米的山谷或林下。分布于海南、广西、云南。

海南野扇花又被称为接骨木，医药用途有外用骨折和治疗癌症。国内对该种植物化学成分的研究有较多报道。庚石山，邹忠梅等人1997年从海南野扇花的根中分离得到6个甾体生物碱，为怕其沙明A(pachy samine A,Ⅰ)，矮陀陀碱F(axillarineF,Ⅱ)、海南野扇花碱A～D(sarco-vagine A～D,Ⅲ～Ⅵ)。其中,化合物Ⅲ～Ⅵ为新的甾体生物碱。丘明华，李忠荣等人从大叶清香桂中分离鉴定了三个新的甾体生物碱大叶清香桂碱A，B，C和三个已知的化合物矮陀陀碱F、矮陀陀碱A、和富贵草碱A。丘明华的研究组还从清香桂(S.vagana stupf)分离到清香桂碱A,A1,B,D(sarcorucin- inesA,A1,B,D)4个新化合物〔13-14〕。Zhong- Mei Zou,Li- Jun Li等人从S.vagans的根中分离得到三种新的甾体生物碱sarcovagenineA～C。

大多数学者研究都是海南野扇花中甾体生物碱的化学结构，本课题旨在建立海南野扇花的质量标准，根据《中国药典》2015年版通则中的水分，灰分，浸出物及重金属的检查，且利用富含甾体生物碱的特性定性鉴别其中生物碱，并根据现有的对照品对其进行含量测定。最终完成海南野扇花的质量标准研究，以供日后有需要的学者参考其质量控制。

二、研究方法和技术路线

1、鉴别

（1）显微特征鉴别

参照《中国药典》2015年版第四部通则中2001显微鉴别法：样品粉末过四号或者五号筛，跳去少许至载玻片上，滴加甘油醋酸试液结合、水合氯醛试液或其他适宜的试液，盖上盖玻片，结合图像所见描述其特征。

（2）薄层色谱鉴别

采用醇类溶剂系统提取法。准确称量一定量得海南野扇花药材粗粉放入圆底烧瓶中，加入适量95%乙醇回流提取，过滤收集提取液，可重复提取数次，合并提取液，减压回收溶剂得总浸膏。总浸膏经过酸化、碱化处理后用氯仿萃取，萃取液回收溶剂得到生物碱提取物。取浸膏加甲醇使溶解，过滤去不溶物作为供试品溶液，用毛细管点样于5cm*10cm的硅胶GF254板上，至装有展开剂的展开缸中上行展开，待展开剂到达前沿线，挥干展开剂，用改良的碘化必钾试剂显色，记录各斑点颜色并计算Rf值。

2、检查项

（1）水分测定

参照《中国药典》2015年版第四部通则中0832水分测定法：

取供试品适量，平铺于干燥至恒重的表面皿，厚度不超过5mm，疏松供品不超过10mm，精密称定，打开瓶盖在105℃干燥5h，将瓶盖盖好，移至干燥器中，冷却30min，精密称定，再在上述温度干燥1h，冷却，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供品中含水量（%）。

（2）灰分测定

参照《中国药典》2015年版第四部通则中2302灰分测定法：

a. 总灰分测定：将样品粉碎，使能通过2号筛，混合均匀后，取供试品3-5g置炽灼至恒重的坩埚中，缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全碳化时，逐渐升高温度至500-600℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计量供试品中总灰分的含量（%）。

b. 酸不溶性灰分：取上项所得的灰分，在坩埚中小心加入稀盐酸约10ml，用表面皿覆盖坩埚，置水浴上加热10min，表面皿用热水5ml冲洗，洗液并入坩埚中，用无灰滤纸滤过，坩埚内的残渣用水洗于滤纸上，并洗涤至洗液不显氯化物反应为止。滤渣连同滤纸移置同一坩埚，干燥，炽灼到恒重。根据残渣重量，计算供试品中酸不溶性灰分的含量（%）

（3）重金属检查

参照《中国药典》2015年版第四部通则中0821重金属检查法检查样品中的重金属。

（4）浸出物测定

参照参照《中国药典》2015年版第四部通则中浸出物测定法：

a．水溶性浸出物测定法

取样品适量精密称定，置150ml锥形瓶中，精密加水50ml，密塞，称定重量，静置1h后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1h。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用水补足减失重量，摇匀，用干燥滤器滤过，精密量取续滤液25ml，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后于105℃干燥3h，移置干燥器中，冷却30min，迅速精密称定重量。除另有规定外，以干燥品计算药材中水溶性浸出物含量。

b．醇溶性浸出物含量测定法

以95%乙醇替代水为溶剂方法同上。

3、含量测定

根据薄层色谱的分离情况，确定本样品中有效化学成分，以作为对照品，根据《中国药典》2015年第四版版0512高效液相色谱法确定色谱条件来测定其中某些生物碱的含量。

参考文献：

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三、论文课题研究进度安排

2017年3月01日----3月10日 确定选题，查阅文献。

2013年3月11日----3月31日 撰写开题报告。

2013年4月01日----4月20日 显微鉴别，水分、灰分、浸出物测定，重金属检查。

2013年4月21日----5月10日 薄层色谱鉴别，含量测定。

2013年5月19日前 完成论文，并进行论文答辩准备。