课题背景
脑缺血再灌注损伤过程中可引起一系列细胞、分子及其调节过程的变化,主要包括线粒体能量代谢障碍、兴奋性氨基酸毒性、离子平衡失调、氧化应激、炎症反应、细胞凋亡、血脑屏障破坏、信号转导特点改变、修复性变化等。其中炎症反应在脑缺血再灌注损伤机制中扮演着重要角色。目前越来越多学者研究关于脑缺血再灌注损伤机制中脑组织缺血后的炎症反应,大量实验已经证实,脑缺血后的炎症反应是造成脑组织继发性损伤的因素之一,在此炎症反应过程中,多种因素相互作用,共同引起再灌注损伤。[1-2]
血脑屏障(Blood Brain Barrier,BBB)的破坏既是缺血性脑卒中损伤的结果,又是导致进一步脑损伤的重要环节。本项目体内以大鼠MCAO模拟脑缺血再灌注损伤,研究OSBP64预防给药对大鼠脑缺血再灌注合并全身炎症反应的脑保护作用。
MCAO模型
动物麻醉后仰卧位固定在鼠板上,剪毛后用75%乙醇简单消毒,颈正中中线开口。沿正中钝性分离两侧鼓泡腺体,暴露颈前肌群,沿胸锁乳突肌内缘分离肌肉和筋膜,暴露颈总动脉及分支。首先分离颈总动脉并穿单线备用,沿颈总动脉向远心端依次分离出颈外动脉和颈内动脉,在颈外动脉和颈内动脉下穿单线备用。结扎颈外动脉后剪断血管,活结结扎颈总动脉近心端,暂时夹闭颈内动脉,在颈外动脉残端上45度剪一小口,向颈内方向插入栓线,松开提紧的颈内动脉,用眼科镊向为内上方轻推栓线,从血管分叉处开始计算距离,当插入深度到达鱼线标记处时,扎紧固定线。大脑中动脉栓塞(MCAO) 90min后,鱼线抽拉出至颈内、外动脉分叉处实现再灌注。[3-5]
预期的实验流程:
预防给药:批SPF级雄性SD大鼠,体重250-300g。随机分为7组,
伪手术组、
脑缺血组(MCAO/R)、
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