三种植物对金黄色葡萄球菌协同抑制作用研究文献综述

 2022-12-27 10:37:36

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

  1. 研究背景

罗汉果属葫芦科植物,产于中国广西、广东等地区[1]。其味甘性凉,具有清喉利咽、去热清肺、润肠通便的功效,在治疗咽喉肿痛、止咳等方面应用广泛[2]。沙棘属胡颓子科沙棘属植物,是蒙医和藏医中的常用药材[3],有很高的营养价值、生态价值和经济价值。而且益智属姜科植物,益智仁为其果实,含有多酚类、氨基酸以及黄酮类等多种化学成分[4]。众多研究表明三种植物均有抑菌功效,设想将其配合使用,以达到食品在保证其感官品质的同时,能有效防腐,保证食品的安全性。

  1. 研究目的

罗汉果富含苷类、黄酮等成分,具有优良的抑菌功效[5],且罗汉果的甜度高、热量低,因此糖尿病、高血压等患者均可食用[6]。沙棘不仅拥有良好的着色性,可美化食物,提升食品的感官品质,更具有抗氧化、抑菌等功能,可以延长食品的保质期[7]。益智具有神经保护、提高学习记忆、抗肿瘤、抗衰老、抗炎和强心等药理作用[8]。以上三种植物的提取物常作为药物成分,或用作食品添加剂,将三种植物的提取物按照一定比例配合,不仅能赋予食品良好的感官特性,同时也能抑制细菌生长,延长食品的保藏期。

  1. 研究内容

以金黄色葡萄球菌作为指标菌,实验初期通过单因素实验和响应面法[9]确定并优化罗汉果抑菌成分的提取工艺,探究各提取因素相互之间的作用关系。其次探究罗汉果、沙棘和益智仁的协同抑菌作用,得出最佳抑菌效果所对应的三种植物的提取液配比。继而对最佳比例的复配液进行抑菌特性的测试,包括最小作用浓度(MIC)、pH、温度、紫外线、光照、糖和盐以及金属离子等因素对其抑菌性能的影响,最终来评价其抑菌性能。

  1. 实验设计方案

4.1.单因素及优化实验

4.1.1 乙醇浓度的确定

将罗汉果烘干粉碎过60目筛,保存于冰箱中备用。称取罗汉果粉末5g,按照1:8料液比分别加入60%、70%、80%、90%、95%、100%乙醇,超声辅助提取1h,然后于50℃水浴浸提3.5h,之后用4000r/min离心10min,所得上清液用减压旋蒸浓缩,配制成1g/mL的提取液。通过管碟法,将培养皿灭菌,每皿加入0.2 mL菌悬液(在600nm波长下,测得菌液吸光度为0.2~0.4,既得浓度为1*106~6*106CFU/ml的菌悬液[10]),制成含菌平板,并等距离放置4个无菌牛津杯(内径6 mm,外径8 mm,高10 mm),将其中3个牛津杯分别加入提取液0.2 mL,另一个牛津杯加入相应浓度乙醇作为对照,每个乙醇浓度梯度做两组平行,于37 ℃培养24 h[11],测定抑菌圈,确定最佳乙醇浓度。

4.1.2浸提时间的确定

称取罗汉果粉末5g,按照1:8料液比,加入最佳浓度乙醇,超声辅助提取1h,然后于50℃水浴分别浸提0.5h、1h、1.5h、2h、2.5h、3.5h,之后用4000r/min离心10min,所得上清液用减压旋蒸浓缩,配制成1g/mL的提取液通过管碟法测定抑菌圈,确定最佳浸提时间。

4.1.3料液比的确定

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