中药真菌毒素的高灵敏均相分析方法文献综述

 2022-12-24 15:55:30

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

研究目的:针对目前常用的中药材中真菌毒素分析方法中的样品前处理较为复杂、操作方法不够环保、实验步骤较繁琐、灵敏度不足等问题,建立中药中真菌毒素的高灵敏均相分析新方法。

研究手段:基于Fe-MOF模拟酶和适配体,构建快速简单的真菌毒素均相化学发光免疫分析方法,并结合DNA信号放大技术提高灵敏度。

中药真菌毒素的高灵敏分析方法

摘要:我国有着悠久的使用中药材进行疾病预防与治疗的历史,然而中药材在采集、储存、运输、加工过程中干燥不完全或保存不当容易发生霉变,影响药材质量和功效。目前常用的针对真菌毒素的分析方法具有一定缺陷,针对这些缺陷,拟发展一种基于适配体、DNA信号放大技术、Fe-MOF模拟酶材料的中药真菌毒素的高灵敏均相分析方法。该方法预期具有操作简单、检测快速、绿色环保、灵敏度高等优点,非常适用于中药材的大批量现场快检。

关键词:均相免疫分析、真菌毒素、MOF模拟酶材料、DNA放大技术

前言

中药材在采集、储存、运输、加工过程中容易发生霉变,产生真菌毒素,影响药材质量和功效。中药材中常见的真菌毒素主要有黄曲霉毒素、赫曲霉毒素、伏马毒素、玉米赤霉烯酮类毒素、杂色曲霉毒素等[1]。随着人们对中药材安全性的愈加重视,真菌毒素含量检测成为中药材质量鉴定中不可缺少的一环。

目前检测真菌毒素的方法主要分为两类:确证法和快速筛选法。确证法主要为传统的仪器分析方法,包括薄层扫描法、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)以及液-质联用检测技术(LC-MS)等;快速筛选法主要包括酶联免疫法(ELSA)和胶体金标记技术[2]。传统的确证法灵敏度高、选择性好,但其缺点在于样品前处理较为复杂、仪器设备昂贵、需专业人员操作,且耗时耗力,尤其是对大量产品进行检测时,对实验室的储存环境也有一定要求。相比于传统的仪器分析方法,快速分析法具有操作简单、快速、稳定性好、单个现场检测成本低等特点[2]。目前常用的快速筛选法主要为非均相免疫法。非均相免疫分析是指将待测物与反应体系分离后再进行检测,如ELISA。非均相免疫分析具有灵敏度高的特点,但该法涉及固定抗体、分离、清洗等步骤,使得操作步骤复杂且费时。其中,真菌毒素偶联物的包被非但不够环保并且可能会给操作人员的健康造成一定风险。 因此,发展一种高效的,绿色的、安全的、灵敏度高的、操作简便的中药真菌毒素高灵敏快速分析方法越来越受到研究人员的青睐。

适配体(aptamer)全称为核酸适配体,也称适配子,是一种具有抗体功能的、能与目标分子强特异性结合的单链寡核苷酸(single strand DNA,ssDNA)。可以与靶分子以高亲和力结合用于中药材真菌毒素的含量的测定,具有人工合成周期短、成本低,靶标数量、种类广泛,易储存、运输,二级结构较为容易预测、易于人工修饰,绿色环保等优点[3]

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