开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 研究背景
C1qtnf1，又名CTRP1，属于CTRP (C1q/ tnf相关蛋白)家族蛋白，hCTRP1位于染色体17q25。其结构上与脂肪粘连素相似，包含4个不同的结构域：一个N端信号肽，一个短的可变结构域，一个胶原结构域和一个与补体C1q同源的C端球形结构域。CTRP蛋白都以三聚体为基本结构单位，CTRP1除了形成同型寡聚体外，还可与家族其它蛋白形成异三聚体。CTRP1转录本主要由脂肪组织表达，抗糖尿病药罗格列酮以及缺乏胰岛素敏感性激素脂联素的动物均会上调其表达，此外，在小鼠体内注射重组CTRP1可以显著降低小鼠的血糖水平。CTRP1的缺失会导致小鼠体内糖脂代谢失衡，并且它的缺乏促进了与肥胖无关的胰岛素抵抗。有研究表明，危重症患者体内CTRP1血浆浓度的升高与败血症和已有的的2型糖尿病有关。
但目前关于CTRP1与胰岛素的具体作用关系尚不明确，缺乏必要的事实依据。本课题拟设计构建CTRP1单敲和过表达细胞株模型，并考察其对胰岛beta;细胞的影响。
- 课题研究内容
- 设计CTRP1-shRNA，转染至MIN6细胞中，构建敲除CTRP1的MIN6细胞株；
- 从3T3-L1细胞中提取构建CTRP1质粒，转染至MIN6细胞中，构建CTRP1过表达的MIN6细胞株；
- 培养孵育正常MIN6细胞株、敲除CTRP1的MIN6细胞株和CTRP1过表达的MIN6细胞株，观察CTRP1对胰岛beta;细胞生长的影响。
- 进度安排
2020.3-2020.4 设计实验方案；
2020.4-2020.5构建CTRP1敲除和过表达的MIN6细胞株；
2020.5-2020.6 比较CTRP1敲除和过表达的MIN6细胞株与正常细胞增殖和凋亡的差异。
- 参考文献
1. Wong GW, Krawczyk SA, Kitidis-Mitrokostas C, Revett T, Gimeno R, Lodish HF. Molecular, biochemical and functional characterizations of C1q/TNF family members: adipose-tissue-selective expression patterns, regulation by PPAR-gamma agonist, cysteine-mediated oligomerizations, combinatorial associations and metabolic functions. Biochem J. 2008;416(2):161–177. doi:10.1042/BJ20081240
2. Rodriguez S, Lei X, Petersen PS, Tan SY, Little HC, Wong GW. Loss of CTRP1 disrupts glucose and lipid homeostasis. Am J Physiol Endocrinol Metab. 2016;311(4):E678–E697. doi:10.1152/ajpendo.00087.2016
3. Davis KE, Scherer PE. Adiponectin: no longer the lone soul in the fight against insulin resistance?. Biochem J. 2008;416(2):e7–e9. doi:10.1042/BJ20082033
4. Seldin MM, Tan SY, Wong GW. Metabolic function of the CTRP family of hormones. Rev Endocr Metab Disord. 2014;15(2):111–123. doi:10.1007/s11154-013-9255-7
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