开题报告内容（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
- 拟研究的问题
紫花前胡是香豆素的主要来源，而甲氧基香豆素类化合物具有很高的药用价值，在医药领域有重要作用。紫花前胡中s-腺苷甲硫氨酸依赖的O-甲基转移酶(OMTs)甲基化是香豆素生物合成中的一种常见修饰，将佛手酚甲基化为佛手内酯的佛手酚氧甲基转移酶（BMT）即为香豆素生物合成中一种重要的甲基转移酶。
本课题通过对紫花前胡佛手酚氧甲基转移酶进行cDNA克隆及生化特性研究，以扩大对香豆素生物合成机制的认识，为深入了解香豆素生物合成的机理和调控提供参考。
- 实验目的
- 学习和掌握PCR、凝胶电泳、胶回收、酶切、载体构建、转化、菌液PCR、
蛋白纯化等技术的原理和操作。
- 熟练地掌握酶蛋白功能验证相关的操作如高效液相色谱仪，质谱仪等。
- 实验方法
本课题拟采用PCR反应对目的基因进行克隆、酶切和质粒重组连接，利用凝胶电泳操作进行分离纯化等，以及分析仪器如高效液相色谱仪，质谱仪等对表达蛋白进行功能验证。
四．文献综述
紫花前胡佛手酚氧甲基转移酶的克隆与功能验证
【摘要】紫花前胡香豆素是紫花前胡的主要活性成分，其中甲氧基香豆素类化合物，如佛手柑内酯、花椒毒素、和异虎耳草素，具有很高的药用价值，在医药领域有重要作用。然而，香豆素生物合成机制相关的主要问题仍未解决，仍未从紫花前胡中克隆到相应的酶。本课题拟对紫花前胡佛手酚氧甲基转移酶 cDNA进行克隆及生化特性研究，调查和鉴定香豆素生物合成相关基因，为研究前胡香豆素的生物合成机制提供有用的信息。
【关键词】 香豆素 氧甲基转移酶
1.香豆素
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