开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
背景：
三七为中医临床重要的药物，其味甘微苦，性温，入肝、胃经，具有止血散瘀、消肿定痛的功效，止血不留瘀，去邪不伤正。三七的主要成分为三七总阜苷、黄酮、挥发油、氨基酸、糖类等有效成分，近年来三七提取物更广泛的用于治疗冠心病、脑血栓等，其临床应用领域有很大拓展，针对三七提取物的研究亦取得了众多成果。目前研究最多的三七提取物主要是三七总阜苷和三七三醇皂等三七提取物。
三七总皂苷被证明在提高血液循环和清除血瘀以及逆转肿瘤的多药耐药中具有重要的作用，有研究表明PNS可以通过减少大鼠中TGF-b1 的表达来减少肺纤维化。然而，目前很少有关于PNS和腹膜炎进行的研究。
炎性反应与免疫有着密切的联系，炎性反应大多涉及到免疫机制。炎性反应是具有血管系统的个体，其组织与细胞对各种损伤性刺激的一种防御反应。“炎症免疫是一个问题的两个方面二者不可分割”。没有免疫反应也就不会有炎性反应，炎性反应是由于剧烈的免疫反应所引起。一方面，参与炎性反应的中性粒细胞、单核/巨噬细胞、T细胞、B细胞、NK细胞皆为免疫细胞。另一方面，免疫细胞分泌的某些细胞因子本身就是重要的炎性细胞因子。吞噬细胞是启动炎性反应的重要效应细胞，包括巨噬细胞和中性粒细胞。吞噬细胞通过其表面表达的多种受体（甘露糖受体、葡聚糖受体、Toll样受体等），迅速识别并摄入外源微生物，形成吞噬体，继而与溶酶体结合形成吞噬溶酶体，微生物通过氧依赖或氧非依赖途径被杀伤。被激活的吞噬细胞同时分泌大量的促炎性因子和趋化因子（IL-1、TNF、IL-6和KC/CXCL8等)，发挥多种非特异性效应，包括致炎、致热、趋化炎性细胞、激活免疫细胞、抑制病毒复制、胞毒作用等。炎性反应早期症状，如血管壁通透性增加、炎性渗出、组织肿胀等伴有炎性递质水平的提升，也必定相应地影响到相关细胞的免疫功能。
在这个研究中，我们的目的是研究三七总皂苷对小鼠腹膜炎的保护及其免疫调节作用。
研究方法：
- 细胞系和培养条件
人结肠癌细胞HCT116培养在RPMI-1640培养基中，添加10％热灭活胎牛血清。细胞保存在37℃并添加了5％二氧化碳的潮湿恒温箱中。
- MTT比色法
细胞毒性用改良MTT法测定。简而言之，将生长期的HCT116细胞接种在96孔板，接种密度为每孔5000个细胞，加入100mu;L培养基，在37℃培养12个小时。然后，在指定期间给予不同浓度的PNS。培养24小时或48小时后，用通用酶标仪在570nm处测定吸光度（A）。细胞毒性百分率=[(1-A570，样品)/A570,对照]times;100％。IC50是抑制50％细胞增殖的浓度，用GraphPad Prism 6.0软件来计算。所有方法重复三次。
- 流式细胞技术
将小鼠随机分组，每组6只，分别给予不同浓度的PNS，灌胃一周后，腹腔注射明矾进行急性腹膜炎造模，造模12h后，分别取小鼠的外周血和腹腔灌洗液。将外周血提取的淋巴细胞和腹腔渗出细胞收集并重悬于PBS中，用T regulatory cell kit来检测小鼠腹腔渗出细胞中T regulatory cell的比例，用流式细胞仪测定。
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