[课题背景]
纤维素是地球上最丰富的可再生性碳源物质,其降解是自然界碳素循环的中心环节。有效利用纤维素可有效解决能源危机和环境污染等重大问题。采用纤维素酶进行水解是保证无污染地将这些纤维素物质转化成简单糖的关键,是纤维素被彻底分解的有效途径。纤维素酶来源广泛,植物、微生物、软体动物、原生动物、昆虫等都能产纤维素酶。其组分较复杂,主要有内切葡聚糖酶、外切葡聚糖酶、beta;-葡萄糖苷酶3 种。不同组分的分子量和等电点大多不同,给纤维素酶分离纯化造成了一定的困难。因而,选择适宜的分离纯化方法是降低纤维素酶生产成本、提高纤维素酶活力的主要途径。
近年来,随着分离纯化技术的发展及新的生物分离技术的不断出现,为纤维素酶的分离纯化提供了许多新的方法和途径。然而在具体应用中仍然存在许多问题,如成本过高,分离量少,难以实现工业化等。因此,将纤维素酶的不同分离纯化方法合理的结合起来,对实现降低成本、提高分离量、实现大规模应用和提高纤维素酶的纯度及稳定性具有重要的现实意义。
[研究内容]
- 利用荧光染色法检测纤维素酶的残留DNA。
- 利用非还原SDS-PAGE法和RP-HPLC法对纤维素酶的纯度进行检测。
[实验流程]
- 荧光染色法检测残留DNA含量
1.材料与方法
1.1供试品
1.2主要试剂及仪器
试剂:
(1)1mol /L 三羟甲基氨基甲烷 (Tris) 溶液( pH7.5),用盐酸调pH值至7.5。
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