一、拟研究的问题
乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一，近年来其发病率不断上升，已成为严重威胁女性健康的头号杀手。虽然医药科技发展迅猛，乳腺癌的治愈率得到有效改善，但为进一步提高患者的治愈率，目前乳腺癌的治疗已经走到“细分”的程度，针对乳腺癌本身的不同类型，可以进行规范个体化的“分型”治疗。因此对乳腺癌检测标志物的研究引起科研工作者的高度重视。本课题将对新型肿瘤标志物HMCN1在乳腺癌中的表达及体外功能进行研究。
二、实验目的
1.学习和掌握细胞培养相关操作；
2.熟练掌握MTT细胞增殖、Transwell细胞迁移实验、qRT-PCR等技术的具体操作。
3.探究HMCN1对乳腺癌细胞体外功能的影响。
三、实验方法
1.肿瘤细胞体外培养： 包括细胞复苏、细胞换液、细胞传代和冻存。
2.质粒转染：将外源DNA掺入使真核细胞获得新的遗传标志的过程。
3.MTT：化学名为 3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐,测定细胞增殖及活性，检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性MTT还原为水不溶性的蓝紫色结晶甲瓒（Formazan）并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臢，用酶标仪在490nm波长处(英文说明书写的是570nm）测定其光吸收值，在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。根据测得的吸光度值（OD值），来判断活细胞数量，OD值越大，细胞活性越强（如果是测药物毒性，则表示药物毒性越小）。
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