课题简介构建表达弓形虫特异性蛋白抗原表位的工程菌。
通过优化工程菌的培养条件，筛选出高表达的条件。
纯化获得可溶性高纯度蛋白，并进行纯度鉴定和抗原性分析，为研制检测试剂奠定基础。
解决的问题构建弓形虫SAG1基因原核表达质粒，诱导表达重组蛋白SAG1，分离纯化并检查其免疫原性研究方法1.菌种保存：取扩大后的菌液600mu;L，加600mu;L甘油（LB培养基配置），混匀，冻存2.接种：菌种解冻,超净台，200mlLB培养基加入200mu;L氨苄青霉素(AMP)，取菌种80mu;L加入培养基中，混匀，封口，37℃，180rmp 过夜，待培养基浑浊变白后取出。
一般一次接种4瓶.3.扩大：超净台，紫外灭菌。
4瓶扩大成16瓶，新培养基加200mL氨苄青霉素， 充分混匀，封口，37℃ 180rmp摇床 1-1.5h4.诱导:待培养液浑浊变白后，每瓶菌液加诱导剂IPTG 4mu;L，诱导4h, 180rmp25℃ ，诱导后去掉牛皮纸。
5、收菌:将菌液转移至离心杯中，2瓶合为一杯，共8杯，两两配平，8000rmp离心20min,去上清得细胞(勿摇晃)。
6.超声破辞:配制600mL PB裂解液，加入溶酶菌600mu;L ，混匀。
取适量裂解液加入离心杯，搅拌，使细胞完全分离开。
平均分入3个烧瓶，冰浴条件下超声破碎，破碎时间6s.间隔时间3s，次数75次。
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