人源NEU1/PPCA复合体在昆虫细胞中的表达与纯化课题性质 radic;基础研究 radic; 应用课题 设计型调研综述 radic; 理论研究一、 研究背景唾液酸(SA)是一类带负电荷的9碳糖化合物,广泛存在在生物体内,由于最早发现于唾液黏蛋白,所以这个家族统称为唾液酸。
与唾液酸代谢有关的酶有两类,一类是催化糖链唾液酸修饰的唾液酸转移酶(ST),一类是去除糖链上唾液酸修饰的唾液酸酶(SA),也称为神经氨酸酶(NA)。
在哺乳动物体内发现4种唾液酸酶,根据剪切底物的不同以及在细胞内分布的不同,将其命名为Neu1, Neu2, Neu3和Neu4[1]。
这四种蛋白在表达模式、定位和功能上存在差异。
Neu1定位于溶酶体,参与胞吐、免疫表达、吞噬和弹性纤维组装。
Neu2定位于细胞浆和质膜,参与成肌细胞和神经元的分化。
Neu3和Neu4均参与神经元的分化、凋亡和黏附,但Neu3定位于质膜,Neu4定位于溶酶体或线粒体、内质网[2]。
哺乳动物PPCA是丝氨酸蛋白酶家族的一员,其功能是对特定的生物活性肽(包括血管紧张素I、P物质、催产素和内皮素I)发挥羧肽酶、去酰胺酶和酯酶的活性[3,4]。
它的单链前体是一种酶原,在酸性pH下裂解为一种成熟的充满活性的双链酶。
PPCA酶原的三维结构揭示了酶激活的一种不同寻常机制:通过两步蛋白水解和内部切除肽的移除,将54 kDa的单链前体转化为32/20 kDa双链形式,由二硫键连接在一起[5]。
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