研究或解决的问题
PD-1与TNF-alpha;是肿瘤治疗中的关键靶点。抗PD-1单克隆抗体与抗TNF-alpha;单克隆抗体也在肿瘤治疗中起到了重要作用。然而现在已经上市的针对这两个靶点的单克隆抗体都有一定的副作用。有研究表明，将抗PD-1单克隆抗体和抗TNF-alpha;单克隆抗体进行联用，有利于增强肿瘤治疗效果和减少不良反应。因此实验室利用CrossMab技术构建了Anti-TNF-alpha;/PD-1 双特异性抗体。本次研究的主要问题是将前期构建的Anti-TNF-alpha;/PD-1 双特异性抗体质粒在293F细胞中进行表达和纯化，并初步测定双抗的结构和其亲和力常数等数据。
研究手段：
将前期构建的Anti-TNF-alpha;/PD-1 双特异性抗体质粒瞬转293F悬浮细胞，通过细胞发酵、Protein A柱亲和层析纯化，获得Anti-TNF-alpha;/PD-1 双特异性抗体蛋白。利用SDS-PAGE鉴定抗体分子量，BCA测定双特异抗体的浓度。以及利用ELISA和Western Blot鉴定抗体。
文献综述：抗TNF-alpha;与抗PD-1联用的可能性
摘要
抗肿瘤坏死因子-alpha;(tumor necrosis factor-alpha，TNF-alpha;)抗体与抗程序性死亡受体-1（PD-1）抗体在现在临床时发挥重要的作用，但是抗TNF-alpha;抗体与抗PD-1抗体都有不同的缺陷或副作用。来自西班牙的Pedro Berraondo教授及其团队在Nature上发表的一项研究表明，TNF阻断可改善抗PD-1单克隆抗体和抗CTLA-4单克隆抗体联合疗法的安全性，且不会减弱甚至能提高双联疗法的作用[1]。
Abstract
Anti-tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) antibodies and anti-programmed death receptor-1 (PD-1) antibodies play an important role in current clinical trials, but both anti-TNF-alpha; antibodies and anti-PD-1 antibodies have different defects or side effects. From Spain Pedro Berraondo professor and his team in Nature, according to a study published in the TNF blocking can improve resistance to PD - 1 monoclonal antibody and the safety of the combined therapy of monoclonal antibodies against CTLA - 4, and will not diminish even can improve the effect of double therapy[1].
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