EGFR和HER2双特异性抗体的表达纯化与鉴定文献综述

 2023-01-29 21:04:19

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

一、题目来源

表皮生长因子受体EGFR和HER2是跨膜受体酪氨酸激酶家族的成员,受体家族与人类癌症的关系非常密切,EGFR和HER2在多种肿瘤细胞表面异常表达,且受体发生改变的肿瘤通常更具有侵袭性,病人也往往预后不良,这使得EGFR和HER2成为抗肿瘤靶向治疗的理想靶点[1-3]。

EGFR受体家族在人肿瘤中可发生多种形式的改变,包括受体基因的扩增,受体过量表达,受体的组成性活化,配体的过量表达以及负调控机制的丧失。最突出的一个例子就是在乳腺癌中HER2基因的大量表达,25-30%的乳腺癌发现有它基因扩增的现象并伴随着病人生存期的缩短。此外,在卵巢癌,结肠癌,前列腺癌,肺癌,肾癌和胰腺癌等中也发现有HER2的表达升高。其他的例子还有,在非小细胞肺癌中EGFR的酪氨酸激酶结构域发生突变,导致其持续性的活化,在头颈部肿瘤中EGFR基因大量扩增并过量表达等,这使得EGFR和HER2成为了很有前景的肿瘤靶向性诊断和治疗位点[4]。

二、选题的目的和意义

affibody分子是一类新的由58个氨基酸残基组成、相对分子质量约为6.5103的亲和性配体,其功能类似于抗体却又有着一些抗体所不具备的性质,如相对分子质量小、折叠速率快、选择性和亲和力高,以及结构稳定,可耐受化学修饰等,因此被称为'人工抗体'[5]。

单域抗体(singledomainantibody,sdAb),又称纳米抗体(nanobody)或重链抗体(heavychainantibody,hcAb),是从骆驼科动物和鲨鱼的血清中分离出的一种抗体,其体积约为传统抗体的1/10。

与传统抗体不同的是,单域抗体仅由重链构成,其抗原结合区仅是一个通过铰链区与Fc区连接的单结构域,而且这个抗原结合区自抗体上分离后仍具有结合抗原的功能,这就为抗体的分子构建提供了一个新方法。基于单域抗体的一系列优点,在免疫实验、诊断与治疗中,它将发挥超乎想象的巨大功能[6]。

在本研究中,研究者将anti-EGFRnanobody和anti-HER2affibody以融合蛋白的形式他通过元和表达系统表达,从而得到EGFR/HER2双特异性抗体并研究其体内靶向作用。

三、论文设计的主要内容(提纲)

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